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高品質(zhì)96T 人三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA試劑盒

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更新時(shí)間：2022-07-12 14:55:30瀏覽次數(shù)：557次

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廈門慧嘉生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

廈門慧嘉生物*經(jīng)營(yíng)人三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒。誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，價(jià)格實(shí)惠，服務(wù)周到，質(zhì)量有保證。歡迎廣告老師來(lái)詢！: :

詳細(xì)介紹

廈門慧嘉生物*經(jīng)營(yíng)ELISA試劑盒及Santa/Abcam抗體、Prospec細(xì)胞因子、Sigma/Amresco/Qiagen、Axygen耗材等生物試劑產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)為大，誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，為客戶提供“zui高質(zhì)量的產(chǎn)品”和“的服務(wù)”。歡迎廣大老師來(lái)詢！: : 1048735792 或登陸http://www.biohj.com/download.aspx（向客服人員索取原版說(shuō)明書）

產(chǎn)品名稱：人三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA Kit

產(chǎn)品英文： Human Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格： 96T

產(chǎn)品類別：人激素類ELISA試劑盒[Human hormone ELISA Kit]

人三碘甲狀腺原氨酸酶聯(lián)免疫分析（T3） ELISA試劑盒使用說(shuō)明書

本試劑盒僅供研究研究使用

預(yù)期應(yīng)用

ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、或其它相關(guān)液體中T3含量。

概述

T3是甲狀腺分泌的兩種主要激素之一。它有兩個(gè)來(lái)源：一是甲狀腺直接分泌，二是由T4外環(huán)脫去一個(gè)碘原子而生成，T3是含碘的氨基酸衍生物，由一個(gè)分子一碘*和一個(gè)分子二碘*偶聯(lián)而成，分子量651D。T3是診斷甲亢的*指標(biāo)，血清T3濃度的測(cè)定對(duì)甲狀腺功能的評(píng)價(jià)和早期診斷甲亢很有價(jià)值，同時(shí)對(duì)甲亢的療效觀察及判定預(yù)后也有重要價(jià)值。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制酶標(biāo)免疫分析法測(cè)定標(biāo)本中T3水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，固相抗體與一定量的*標(biāo)記的T3和非標(biāo)記抗原（標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品）進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)抑制反應(yīng)，待測(cè)定的標(biāo)本量越多，抗體與*標(biāo)記的T3結(jié)合就越少，反之結(jié)合就多。zui后再加入HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的T3呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

試劑盒組成

1．酶聯(lián)板：一塊（96孔）

2． T3標(biāo)準(zhǔn)品：1ml/瓶×6瓶。其濃度依次為10 ng /mL ，5 ng /mL，2.5 ng /mL和 1.25 ng /mL，0.625 ng/mL，0 ng/mL。

3．檢測(cè)溶液A：1×6 ml

4．檢測(cè)溶液B：1×6 ml

5．底物溶液A：1×6 ml

6．底物溶液B：1×6 ml

7．濃洗滌液：2 ×25ml，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

8．終止液：1×6ml。

標(biāo)本的采集及保存

1．血清：標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2．血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注：標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

操作步驟

各試劑在使用前平衡至室溫。

1．加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。除空白孔外，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)溶液或待測(cè)樣品50μl，以及檢測(cè)溶液A 50μl，輕輕混勻，37℃，60分鐘。

2．洗板3-5次，350μl/每孔，甩干。

3．每孔加檢測(cè)溶液 B 50μl，37℃，30分鐘，洗板3-5次，甩干。

4．依序每孔加底物溶液A、B各50μl，37℃避光顯色15分鐘。

5．依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)。用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。

注：

1．每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。

2．為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)。

洗板方法

手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層

吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

特異性

本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人T3，且與其它相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。

檢測(cè)范圍：

0. 15 ng /mL -40 ng /mL

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（普通坐標(biāo)），在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)

1．洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。

2．一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

3．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。

4．如標(biāo)本中T3含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。

5．底物請(qǐng)避光保存。

6．溫育反應(yīng)過(guò)程中請(qǐng)?zhí)衬z板

說(shuō)明

1. 在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。

2. 小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。而且，洗滌不充分將影響試驗(yàn)結(jié)果。

3. 試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃，部分試劑保存于2-8℃，具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。

4. 濃洗滌液會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

5. 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

6. 中、英文說(shuō)明書可能會(huì)有不*之處，請(qǐng)以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

7. 所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。

8. 有效期：6個(gè)月

關(guān)鍵詞：酶標(biāo)儀實(shí)驗(yàn)臺(tái) 洗板機(jī)

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