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人肺動脈組織提取物【Lung: Normal Human Pulmonary Artery Derivatives】
人肺動脈組織提取物說明書肺位于胸腔內,主要包含內皮,上皮,成纖維三種細胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍人肺動脈組織中高質量的總RNA,PCR準備的*條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院,采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜
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產品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
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注意事項:
. 接收到人肺動脈組織提取物說明書,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
培養步驟:
人肺動脈組織提取物說明書對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?
兔抗CALCB多克隆抗體 英文名:Anti-CALCB rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CHRM4多克隆抗體 英文名:Anti-CHRM4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CSNKA多克隆抗體 英文名:Anti-CSNKA rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
Anti-CSNK2B rabbit polyclonal antiboy 英文名:Anti-CSNK2B rabbit
兔抗KRT6A/KRT6B/KRT6C多克隆抗體 英文名:Anti-KRT6A/KRT6B/KRT6C rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗KRT4多克隆抗體 英文名:Anti-KRT4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗KRT6多克隆抗體 英文名:Anti-KRT6 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CMTM多克隆抗體 英文名:Anti-CMTM rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗PLEKHO多克隆抗體 英文名:Anti-PLEKHO rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
兔抗CNGA多克隆抗體 英文名:Anti-CNGA rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
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兔抗CLN5多克隆抗體 英文名:Anti-CLN5 rabbit polyclonal antiboy 冷凍(-20℃) 避光
人肺動脈組織提取物說明書Sodlum Lauroylsarcosine 十二烷基肌氨酸鈉 25g 瓶
BES N,N-雙(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸 0g 瓶
Pristimerin 扁塑藤素 258-84-0 20mg
N,N,N,N-四甲對苯二胺酸鹽 g 瓶
Lipofectamine ® 3000 Transfection Reagent(原裝) .5ml 支
DMEM (高) 0×L 盒
His標簽純化樹脂(50%漿料) 0ml 瓶
Sodium Aescinate (混合物,鑒別用) 20mg
Dimethyl Dodecanedioate 十二碳二酸二甲酯 0g 瓶
一次性針頭式濾器(50個/盒) 0.45um 個
Methyl Linoleate 甲酯 2-63-0 00mg
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