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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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豬載脂蛋白B00(apo-B00)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

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更新時(shí)間:2025-01-03 17:58:05瀏覽次數(shù):1301次

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豬載脂蛋白B00(apo-B00)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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產(chǎn)品名稱:豬載脂蛋白B00(apo-B00)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱:Porcine apo-B00 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

豬載脂蛋白B00(apo-B00)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
豬載脂蛋白B00(apo-B00)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

PNLIPRP2    重組人 Galactolipase / PNLIPRP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    TranscriptAid™ T7 High Yield Transcription Kit
RCN3    重組人 RCN3 蛋白 (His 標(biāo)簽)    Genomic DNA Purification Kit
RNASE    重組人 RNase A / Ribonuclease A / RNASE 蛋白 (His 標(biāo)簽)    Silica Bead DNA Gel Extraction Kit
CNPY4    重組人 CNPY4 蛋白 (His 標(biāo)簽)    DecaLabel™ DNA Labeling Kit
PDIA4    重組人 ERP72 / PDIA4 蛋白 (His 標(biāo)簽)    DecaLabel™ DNA Labeling Kit
PDIA4    重組人 ERP72 / PDIA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    Biotin DecaLabel™ DNA Labeling Kit
TMEM27    重組人 TMEM27 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    Biotin DecaLabel™ DNA Labeling Kit
CLDN    重組人 CLDN / Claudin- 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    Biotin Chromogenic Detection Kit
CFHR    重組人 CFHR 蛋白 (His 標(biāo)簽)    Biotin Chromogenic Detection Kit
CLEC6A    重組人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    DreamTaq™ PCR Master Mix (2X)
ASL    重組人 Arginosuccinase / ASL 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)    DreamTaq PCR Master Mix (2X)
CDCP    重組人 CDCP / CD38 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    DreamTaq™ PCR Master Mix (2X)
FKBP7    重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (His 標(biāo)簽)    DreamTaq PCR Master Mix (2X)
MAG    重組人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    DreamTaq™ Green PCR Master Mix (2X)
MSLN    重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 (His 標(biāo)簽)    DreamTaq Green PCR Master Mix
IFNB    重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白    DreamTaq™ Green PCR Master Mix (2X)23-0350-50    KT5823(PKG 抑制劑 )    50μg
80602-50    柱式凋亡 DNAout    50 次
RIPA 裂解液 ( 中 )    00mL    
COX IV 兔單抗    20μL    
dNTP 溶液,2.5mM    0.5mL    
0.5mL DNA 離心超濾管 (9-5 KD)    個(gè)    
D007-    Illumina 高通量 DNA 測序    次
30560-0    Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞    0.mL×0
小鼠抗 T7 標(biāo)簽單抗    00μL    
甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷    25g    
三氟    00mL    
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 袋裝 )    000 支    
穿刺培養(yǎng)基    0 管    
豬載脂蛋白B00(apo-B00)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存23-0240-00    Etoposide( / 鬼臼乙叉苷 )    00μL
6080-00    柱式腐殖酸清除劑    00 次
SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )    20L    
dNTP 和引物清除劑    00 次    
包涵體微量純化試劑盒    20 次    
植物葉綠體蛋白提取試劑盒    50 次    
CAS5486-84-0    固藍(lán) BB 鹽    5g

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