NCI-H460 H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）

生長(zhǎng)培養(yǎng)基:

RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： NOX1 ELISA Kit

Mouse platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)檢測(cè)試劑盒

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 大鼠IX(FIX)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGM(HumanGasicMucin)ELISAKit人胃粘液素

細(xì)胞繁殖與毒性高通量篩選熒光檢測(cè)試劑盒500次

RatsubstancePreceptor,SP-RELISAKit大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein

FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (抗原)

FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (抗原)

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)

REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

NCI-H460 H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Glucose depende insulin releasing polypeptide (GIP) ELISA Kit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)檢測(cè)試劑盒

Humangrowth-associatedprotein43,GAP-43ELISAKit 人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43(GAP-43)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanactivatinganscriptionfactor-1,ATF-1檢測(cè)試劑盒人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質(zhì)過(guò)氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次

MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISAKit小鼠血管生成素4(ANG-4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-1(mouse MIP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-2(mouse MIP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-3a(mouse MIP-3a)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-3β(mouse MIP-3β)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。