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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

參  考  價(jià):1 - 2200 /臺(tái)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    代理商

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    上海市

更新時(shí)間:2024-11-06 15:50:00瀏覽次數(shù):570次

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規(guī)格  5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 貨號(hào) GOY-01X1739
 生長(zhǎng)特性  貼壁 細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣
用途   僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞正在出售的產(chǎn)品:TNFRSF14 Others Human 人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人細(xì)胞裂解液 CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人細(xì)胞裂解液 IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細(xì)胞裂解液

細(xì)胞處理:

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞


PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

商品屬性

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

鑒定

STR鑒定正確

種屬

生長(zhǎng)特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

人細(xì)胞系

 

商品介紹

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)方案A(默認(rèn))

生長(zhǎng)培養(yǎng)基:

MEM(含NEAA)+10% FBS1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2-3/

參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))

背景描述 PLC/PRF/5細(xì)胞分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)PLC/PRF/5細(xì)胞原先被支原體污染,后用BM-cycline去除支原體。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。

(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。

(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。

(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。

(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

(9)細(xì)胞凍存

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞


細(xì)胞接收后的處理:

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品:
PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞

大鼠葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: GPI ELISA Kit

Mouse plasma alpha granule membrane protein (GMP-140) ELISA Kit 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)檢測(cè)試劑盒

Ratai-IVIgGaibodyELISAKit 大鼠抗IVIgG抗體檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGP-II(HumanGlycogenphosphorylaseII)ELISAKit人糖原0酸化酶同工酶II

細(xì)胞蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量檢測(cè)試劑盒20

Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T

SIRPA重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 Protein

DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原

GALK1重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CYB5R1 Protein Human 重組人 CYB5R1 蛋白

TNFRSF14 Protein Mouse 重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原

CYB5R1 Protein Human 重組人 CYB5R1 蛋白

SIRPA重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 Protein

TNFRSF14 Protein Mouse 重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

GALK1重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

PLC/PRF/5人肝癌細(xì)胞小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Human prealbumin (PA) ELISA Kit 人前白蛋白(PA)檢測(cè)試劑盒

Humanmyosinheavychain,MHCELISAKit 人肌球蛋白重鏈(MHC)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanadeno-associatedvirus,AAV檢測(cè)試劑盒人腺相關(guān)病毒(AAV)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T

直腸標(biāo)記K-ras糞便檢測(cè)突變巢式分析試劑盒50

Mousealpha-L-fucosidase,AFUELISAKit小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠膠原酶II(CollagenaseII)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝


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