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細胞系

Hcy Elisa試劑盒過程材料、試劑配置

時間:2017/12/12閱讀:893
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、ELISA板 :于Hcy Elisa試劑盒的產品稱為ELISA板,上標準的微量滴定板為8×2的96孔式,需要購買。常用聚苯乙烯和聚氯乙烯材料。注意:聚苯乙烯材料目前只有進口,特點是孔大,加滿約300ul,此時實驗中所加各試劑(包被液、一抗、二抗、顯色液、終止液等)均為00ul體積。而聚氯乙烯多為國產,孔較小,加滿約200ul,此時各試劑只需加50ul體積即可
2、各試劑配制 
)包被液(PH6.3的碳酸鹽緩沖液)無水Na2CO3 0.696g NaHCO3  0.2856g SW  00ml *溶解至4℃,一周內使用
2)PBST配方  NaCl  8.0g  Na2HPO4.2H2O   2.9g KCl   0.2g KH2PO4   0.24g TW-20    0.5ml SW     000ml 
3)底物緩沖液  Na2HPO4  3.682g 檸檬酸   .02g DW    200ml 不需滅菌,4℃保存
4)3% H2O2  30%H2O2   00ml  SW  900ml
5)顯色劑  底物緩沖劑   0ml 3%H2O2     50ul OPD     5mg 其中H2O2 zui后加
6)終止液  濃硫酸:SW = :8  濃硫酸緩慢加入到SW 中,并攪拌散熱
包被:所謂37℃反應,一般取一個37℃的水浴鍋,在水面放一較大泡沫板,將ELISA板臵于泡沫板上即可,其余步驟的37℃反應操作同此;  整個ELISA過程中所有需要較長時間等待的步驟(包被、封閉、加一抗孵育、加二抗孵育)均需要將ELISA包起來再放入冰箱或水浴鍋中,一般可直接用一次性EP手套套起來即可。 
2 洗滌:zui常規的洗滌步驟是洗滌3次,每次間隔5min,具體實驗可能會微調,洗滌次數可以3-6次不等,間隔5-0min不等;  每次洗滌后要將ELISA板盡可能拍干后在進行下一步操作,尤其是每個洗滌步驟的zui后一次洗滌要盡可能拍干,拍干可在紗布、吸水紙上進行,也可以購買洗板機。 
3 顯色:Hcy Elisa試劑盒配制顯色液時3%過氧化氫一定要zui后加入,加入混勻后立刻分裝到ELISA板中,即在加過氧化氫前要*完成洗滌的操作;  OPD一般在倒數第二次洗滌前加入,要留有約0min時間以確保OPD*溶解。
50mg    0053-20040    鹽酸    含量測定
00mg    0058-20002    鹽酸    含量測定
00mg    00522-20060    異丙托溴胺    含量測定
200mg    00525-20030    異丙    含量測定
50mg    00526-20030    羥    含量測定
50mg    00527-20040        含量測定
50mg    00528-20040    愈創甘油醚    含量測定
00mg    0053-20050    鹽酸美司坦    鑒別
00mg    00536-20050        含量測定
Hcy Elisa試劑盒

 

 

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