① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

英文名稱：Mouse Renal Artery Smooth Muscle Cells

組織來(lái)源：腎動(dòng)脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小鼠腎動(dòng)脈平滑肌分離自腎動(dòng)脈組織；腎動(dòng)脈的分支為葉間動(dòng)脈，穿行于腎柱內(nèi)，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動(dòng)脈。小葉間動(dòng)脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管，并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動(dòng)脈，進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯集成出球小動(dòng)脈，出腎小體。直小動(dòng)脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎，注入下腔靜脈。腎動(dòng)脈既是腎的營(yíng)養(yǎng)血管，又是腎的機(jī)能血管，與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動(dòng)脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個(gè)毛細(xì)血管網(wǎng)：腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過形成原尿；球后毛細(xì)血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是腎動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： PⅢ ELISA Kit

Mouse peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)檢測(cè)試劑盒

MouseADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumaenascin-R,TN-RELISAKit人肌腱蛋白R

通用型野油菜黃單孢菌柑桔致病變種(Xahomonascampesispv.cii;Xccit)試劑盒20次

ELISAKitHyp大鼠羥脯

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

phospha-Bcl-xL (pSer62 0.5mgphospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) 0酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原

SOD1重組人 SOD1 / Superoxide Dismutase 蛋白 Protein

DBI Protein Human 重組人 DBI / ACBD1 蛋白

CNTN1 Protein Human 重組人 Contactin 1 / CNTN1 蛋白

phospha-Bcl-xL (pSer62 0.5mgphospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse) 0酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原

DBI Protein Human 重組人 DBI / ACBD1 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Egypt/3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

CNTN1 Protein Human 重組人 Contactin 1 / CNTN1 蛋白

SOD1重組人 SOD1 / Superoxide Dismutase 蛋白 Protein

小鼠淋巴球性脈絡(luò)叢腦膜病毒抗體(LCM-Ab)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Globin / haptoglobin with rat (Hpt/HP) ELISA Kit 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)檢測(cè)試劑盒

Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2ELISAKit 人癌易感蛋白2(BRCA-2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanadiposediffereiation-relatedprotein,ADRP檢測(cè)試劑盒人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物a-(a-AMYLASE)活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mouseadrenomedullin,ADMELISAKit小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白檢測(cè)試劑盒   小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白試劑盒、小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠骨退化特異標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒   小鼠骨退化特異標(biāo)志物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠骨退化特異標(biāo)志物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨退化特異標(biāo)志物試劑盒、小鼠骨退化特異標(biāo)志物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠骨特異性堿性0酸酶檢測(cè)試劑盒   小鼠骨特異性堿性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠骨特異性堿性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨特異性堿性0酸酶試劑盒、小鼠骨特異性堿性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠骨橋素檢測(cè)試劑盒   小鼠骨橋素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠骨橋素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨橋素試劑盒、小鼠骨橋素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用