細胞簡介：

人結腸癌組織源分離自患有結腸癌病人的結腸癌組織；結腸癌是常見的發生于結腸部位的消化道惡性腫瘤，好發于直腸與乙狀結腸交界處，以40～50歲年齡組發病率高，男女之比為2～3：1。發病率占胃腸道腫瘤的第3位。結腸癌主要為腺癌、黏液腺癌、未分化癌。大體形態呈息肉狀、潰瘍型等。結腸癌可沿腸壁環行發展，沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤，除經淋巴管、血流轉移和局部侵犯外，還可向腹腔內種植或沿縫線、切口面擴散轉移。慢性結腸炎患者、結腸息肉患者、男性肥胖者等為易感人群。人結腸癌組織源不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究，如蛋白質組學、基因組學、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。人結腸癌組織源在生物醫藥領域有不可替代性作用。

方法簡介：

公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人結腸癌組織源經檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

豬肌球蛋白輕鏈0酸酶(MLCP)ELISA 試劑盒

Neuroophic factor glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 人膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)檢測試劑盒

Porcineacetylcholine,ACHELISAKit 豬乙酰(ACh)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAlphaNAG(MouseAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶

血液離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒20次

PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISAKit植物吲哚乙酸(IAA)檢測試劑盒規格：96T/48T

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白

CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白

PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein

小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human melatonin sulfate (MS) ELISA Kit 人褪黑色素(MS)檢測試劑盒

HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickeni-iodothyronine,T3檢測試劑盒雞三甲狀腺原(T3)檢測試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞TNFALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseEsiol,E3ELISAKit小鼠雌三醇(E3)檢測試劑盒規格：96T/48T

人結腸癌組織源細胞小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖皮質類固醇受體(GR)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。