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當(dāng)前位置:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>人原代細(xì)胞>> 人鼻黏膜上皮細(xì)胞
貨號 | EY-XY4589 | 組織來源 | 鼻黏膜 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細(xì)胞簡介:
人鼻黏膜上皮分離自鼻黏膜組織;黏膜是覆蓋在人體內(nèi)消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。根據(jù)部位不同,有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結(jié)構(gòu)也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜,簡稱鼻黏膜,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。根據(jù)結(jié)構(gòu)與功能的不同,鼻黏膜又分為前庭部、呼吸部和嗅部三部分。前庭部是鄰近外鼻孔的部分,有豐富的鼻毛可以阻擋空氣中較大的塵粒吸入。呼吸部占鼻黏膜的大部,有發(fā)達(dá)的上皮纖毛,它們可向咽部擺動,黏著有塵粒、細(xì)菌的黏液排向咽部,終將它們排出體外。此外,此部分有豐富的血管與腺體,對吸入的空氣有加溫和濕潤作用。嗅部黏膜范圍較小,主要位于鼻腔頂部。它含有一種專司嗅覺的嗅細(xì)胞及嗅腺,它們分泌能溶解到達(dá)嗅區(qū)的含氣味的微粒,刺激嗅細(xì)胞表面上的嗅毛產(chǎn)生嗅覺,而且還由于嗅細(xì)胞具有不同的受體,可分別接受不同化學(xué)分子的刺激,因此可產(chǎn)生不同的嗅覺。
產(chǎn)品名稱 | 組織來源 | 鼻黏膜 | |
英文名稱 | Human Nasal Mucosal Epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
實驗室分離的人鼻黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的人鼻黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人鼻黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人脂肪酶(Lipase)ELISA 試劑盒
People of lipoxin A4 (LXA4) ELISA Kit 人脂氧素A4(LXA4)檢測試劑盒
HumanNeuroglobin,NGBELISAKit 人腦紅蛋白(NGB)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
humanHypotheticalproteinLOC677168檢測試劑盒人假定蛋白LOC677168檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性比色法定量檢測試劑盒25次
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
S100A4重組小鼠 S100A4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
肌原纖蛋白1(FBN1)重組蛋白 Recombinant Fibrillin 1 (FBN1)
STC2重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 Protein
CDH16 Protein Human 重組人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 蛋白
NTRK1 Protein Canine 重組狗 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
肌原纖蛋白1(FBN1)重組蛋白 Recombinant Fibrillin 1 (FBN1)
CDH16 Protein Human 重組人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 蛋白
S100A4重組小鼠 S100A4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
NTRK1 Protein Canine 重組狗 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
STC2重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 Protein
小鼠(Cyt-C)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)檢測試劑盒
HumanAcetylcholinesterase,AChEELISAKit 人乙酰酯酶(AChE)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenImmunoglobulinG,IgG檢測試劑盒雞免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CYP2B1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
人鼻黏膜上皮細(xì)胞小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠心肽(ANP)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
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