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當(dāng)前位置:上海一研生物科技有限公司>>原代細胞>>大鼠原代細胞>> 大鼠羊膜成纖維細胞
貨號 | EY-XY4464 | 組織來源 | 羊膜 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
產(chǎn)品名稱:大鼠羊膜成纖維細胞
英文名稱:Rat Amniotic Fibroblast Cells
組織來源:羊膜
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
大鼠羊膜成纖維分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿浴LケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細胞,包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì),其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜成纖維細胞主要來自基底膜、致密層、纖維母細胞層。
實驗室分離的大鼠羊膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠羊膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基:含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠羊膜成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
取材→分離→培養(yǎng)和維持
1、取材
人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細胞的體外培養(yǎng)。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應(yīng)嚴格無菌
③ 防止機械損傷
④ 去除無用組織和避免干燥
⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等
⑥ 作好記錄
2、分離
人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密,不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開,使細胞解離出來。
(1)懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
(2)實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
① 機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
大鼠(GSH)檢測試劑盒 ,英文名: GSH ELISA Kit
Pig two D dimer (D2D) ELISA Kit 豬D二聚體(D2D)檢測試劑盒
大腸桿菌通用型(EC-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIP-1Delta(MouseMacrophageInflammatoryProtein1Delta)ELISAkit小鼠巨噬細胞性蛋白1δ
體液科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定性檢測試劑盒20次
ELISAKitIFN-α犬α干擾素
SLAMF6重組小鼠 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein
AM (Adrenomedullin; ADM 0.1mgAM (Adrenomedullin; ADM) 腎上腺髓質(zhì)素(多肽抗原)
ENPP5重組人 ENPP5 蛋白 Protein
CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白
TLR2 Protein Rat 重組大鼠 TLR2 蛋白
半乳糖凝集素8(GAL8)重組蛋白 Recombinant Galectin 8 (GAL8)
CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白
BST2重組小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 蛋白 (Fc 標簽) Protein
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標簽)
IL22重組人 IL22 / IL-22 / Interleukin 22 蛋白 Protein
小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat Gao Min three iodothyronine (u-T3) ELISA Kit 大鼠高敏三甲狀腺原(u-T3)檢測試劑盒
HumanSialicacid,SAELISAKit 人唾液酸(SA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickenbasicfibroblastgrowthfactor,bFGF檢測試劑盒雞堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細胞BCL2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠羊膜成纖維細胞小鼠血管性血友病因子(mouse VWF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體-2(mouse VEGF R2) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠軟骨糖蛋白39(mouse YKL-40) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
b 1-42(Amyloid b 1-42) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 德國 IBL
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