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當前位置:上海一研生物科技有限公司>>原代細胞>>大鼠原代細胞>> 大鼠卵泡基膜細胞
貨號 | EY-XY4371 | 組織來源 | 卵巢 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
產(chǎn)品名稱:大鼠卵泡基膜細胞
英文名稱:Rat Follicle Basement Membrane Cells
組織來源:卵巢
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
大鼠卵泡基膜(卵泡膜細胞)分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成,垂體(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發(fā)育,其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞,并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に亍R虼耍雅菽ぜ毎谏硟?nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾病(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中,卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,參與構(gòu)成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調(diào)節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關(guān)報道,但是有關(guān)卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。
實驗室分離的大鼠卵泡基膜采用先機械分離后膠原酶消化結(jié)合Percoll密度梯度離心法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠卵泡基膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
包被條件:
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠卵泡基膜體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的培養(yǎng)狀態(tài)。
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠肝細胞生長因子受體(c-MET/HGFR)檢測試劑盒 ,英文名: c-MET/HGFR ELISA Kit
Porcine ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 豬白介素8(IL-8/CXCL8)檢測試劑盒
傷寒桿菌(ST)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMDA(Mousemalondialchehyche)ELISAKit小鼠二
體液羥賴(HYL)含量比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitCholicacid牛膽酸
HAPLN1重組人 HAPLN1 蛋白 Protein
神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)重組蛋白 Recombinant Neurotrophin 4 (NT4)
RNF43重組人 RNF43 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CCNA1 Protein Human 重組人 CCNA1 / Cyclin-A1 蛋白
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)重組蛋白 Recombinant Neurotrophin 4 (NT4)
CCNA1 Protein Human 重組人 CCNA1 / Cyclin-A1 蛋白
HAPLN1重組人 HAPLN1 蛋白 Protein
HA Protein Influenza 重組甲型流感 H6N1 (A/northern shoveler/California/HKWF115/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
RNF43重組人 RNF43 蛋白 (Fc 標簽) Protein
小鼠乙酰轉(zhuǎn)移酶(CHAT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble cluster of differeiation 86 (B7-2/sCD86) ELISA Kit 人可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)檢測試劑盒
HumanLipaseELISAKit 人脂肪酶(Lipase)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor5-ELISAKit大鼠5核苷酸酶
飲料阿斯巴塘(aspaame)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISAKit小鼠巨噬細胞性蛋白2(MIP-2)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠卵泡基膜細胞雄激素結(jié)合蛋白 英文名稱: Androgen Binding Protein 規(guī)格: 英文縮寫: ABP
激活素A 英文名稱: Activin A 規(guī)格: 英文縮寫: Activin A
促上腺皮質(zhì)激素 英文名稱: Adrenocor Ticoopic Hormore 規(guī)格: 英文縮寫: ACTH
乙酰 英文名稱: Acetylcholine 規(guī)格: 英文縮寫: ACH
取材→分離→培養(yǎng)和維持
1、取材
人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細胞的體外培養(yǎng)。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應(yīng)嚴格無菌
③ 防止機械損傷
④ 去除無用組織和避免干燥
⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等
⑥ 作好記錄
2、分離
人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密,不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開,使細胞解離出來。
(1)懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
(2)實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
① 機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
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