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當(dāng)前位置:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>大鼠原代細(xì)胞>> 大鼠顱蓋造骨細(xì)胞
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更新時(shí)間:2024-12-10 12:32:50瀏覽次數(shù):38次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線貨號 | EY-XY4367 | 組織來源 | 顱骨 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
產(chǎn)品名稱:大鼠顱蓋造骨細(xì)胞
英文名稱:Rat Calvarial Osteoblast Cells
組織來源:顱骨
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
大鼠顱蓋造骨分離自顱骨組織;造骨細(xì)胞(osteoblast)亦稱成骨細(xì)胞。是參與骨組織形成的細(xì)胞。顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),起著保護(hù)和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內(nèi)有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu),構(gòu)成面部的支架,共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞,負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建,骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域,分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì),分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),形成骨吸收陷窩;其后,成骨細(xì)胞移行至被吸收部位,分泌骨基質(zhì),骨基質(zhì)礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠顱蓋造骨經(jīng)ALP染色檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
包被條件:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠顱蓋造骨體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的培養(yǎng)狀態(tài)。
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠印度刺猬因子(IHH)檢測試劑盒 ,英文名: IHH ELISA Kit
Mouse immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒
MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 小鼠骨保護(hù)素(OPG)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanElastaseELISAKit人彈性蛋白酶
細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量檢測試劑盒20/50次
ELISAKitcAMP大鼠環(huán)0酸腺苷
HGF重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein
干擾素α(IFNα)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha (IFNa)
WARS重組人 WARS / TrpRS 蛋白 Protein
FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白
FCGR2A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated
干擾素α(IFNα)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha (IFNa)
FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白
HGF重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein
FCGR2A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated
WARS重組人 WARS / TrpRS 蛋白 Protein
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human nephrin (nephrin) ELISA Kit 人蛋白(nephrin)檢測試劑盒
humahyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
humanai-nucleosomeaibodyIgG,AnuA-IgG檢測試劑盒人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量檢測試劑盒20次
HumanUbiquitin,UbELISAKit人泛素蛋白(Ub)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠顱蓋造骨細(xì)胞小鼠β-防御素(β-DF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)ELISAKit ELISA. 96T/48T
取材→分離→培養(yǎng)和維持
1、取材
人和動物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應(yīng)嚴(yán)格無菌
③ 防止機(jī)械損傷
④ 去除無用組織和避免干燥
⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等
⑥ 作好記錄
2、分離
人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密,不利于各個細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開,使細(xì)胞解離出來。
(1)懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
(2)實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
① 機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
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