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當(dāng)前位置:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>大鼠原代細(xì)胞>> 大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
貨號 | EY-XY4337 | 組織來源 | 骨髓 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗 |
本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
產(chǎn)品名稱:大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
英文名稱:詳見說明書
組織來源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
大鼠骨髓樹突狀分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;DC細(xì)胞,全稱樹突狀細(xì)胞(DC),是近年來倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC),能攝取、加工及呈遞抗原,啟動T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞,因其細(xì)胞膜向外伸出,形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起,故而命名為樹突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。
公司實(shí)驗室分離的大鼠骨髓DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗室分離的大鼠骨髓樹突狀(DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 樹突狀
傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠彈性蛋白(ELN)檢測試劑盒 ,英文名: ELN ELISA Kit
Porcine thrombomodulin (TM) ELISA Kit 豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)檢測試劑盒
ELISA 小鼠雄激素結(jié)合蛋白(mouse ABP) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLPO(Humanlipidperoxlde)ELISAKit人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶
通用細(xì)胞載玻片制備試劑盒50次
ELISAKitLH雞促黃體激素
XCL1重組小鼠 XCL1 蛋白 Protein
白介素2(IL2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 2 (IL2)
CKB重組人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白 Protein
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 標(biāo)簽)
IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白
Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mgApelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 標(biāo)簽)
EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 Protein
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MFGE8重組人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 Protein
小鼠脂多糖(LPS)檢測試劑盒 96T/48T
Human ai hepatitis B virus core aibody (HBcAb) ELISA Kit 人抗乙型肝病毒核心抗體(HBcAb)檢測試劑盒
HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISAKit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAAA(Humanai-albuminaibody)ELISAKit人抗白蛋白抗體
中和液100毫升
MouseneuropeptideY,NP-YELISAKit小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)血栓前體蛋白 英文名稱: thrombus precursor protein 規(guī)格: 英文縮寫: TpP
可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1 英文名稱: soluble iggering receptor expressed on myeloid cells-1 規(guī)格: 英文縮寫: sEM-1
胸苷酸合成酶 英文名稱: thymidylate syhase 規(guī)格: 英文縮寫: TS
敏感蛋白-1 英文名稱: thrombospondin 1 規(guī)格: 英文縮寫: TSP-1
取材→分離→培養(yǎng)和維持
1、取材
人和動物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應(yīng)嚴(yán)格無菌
③ 防止機(jī)械損傷
④ 去除無用組織和避免干燥
⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等
⑥ 作好記錄
2、分離
人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密,不利于各個細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開,使細(xì)胞解離出來。
(1)懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
(2)實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
① 機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
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