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培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
下列是產品的訂購信息:
產品名稱 | SW116細胞,人大腸癌細胞說明書 |
英文名稱 | SW116 cells, human colon cancer cells |
貨號 | EY-X63667 |
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
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實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
2-甲-6-乙吡:119.162- methyl -6- vinyl pyridine:1122-70-9 C8H9N
5--1,2,3-噻二唑:101.135- -1,2,3- two:4100-41-8 C2H3N3S
5-喹哪:158.25- amino group:54408-50-3 C10H10N2
連翹苷Phillyrin:534.55C27H34O11:487-41-2
4-(6-氯-3-噠嗪)啉:199.644- (6- -3-) Ma Lan:17259-32-4 C8H10ClN3O
1,5-二羥萘:160.171,5- two hydroxy naphthalene:83-56-7 C10H8O2
堿式鋁:162.08Basic aluminum acetate:142-03-0 Al(OH)C4H6O4; Al(OH)(CH3COO)2
二甲臢新四唑:598.71Two new triazole formazen:21520-87-6 C38H30N8
DBD-COCl:332.76DBD-COCl:156153-43-4 C11H13ClN4O4S
SW116細胞,人大腸癌細胞說明書小鼠 ANGPT2 / ANG2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
人 PPP2R3B 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 PDGF-C / SCDGF 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 TREM2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 NGF 基因全長ORF克隆 (表達載體)
人 VNN1 / Vanin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 SERPINC1 基因全長ORF克隆
人 THBS2 基因全長ORF克隆
人 GOLM1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
小鼠 SIRT3 基因全長ORF克隆
人 CD33 / Siglec-3 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
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