細胞簡介：

胃壁一般由 3層組織構(gòu)成，內(nèi)層是粘膜層，外層是漿膜層,中間是由平滑肌組成的肌層。成纖維細胞是結(jié)締組織中常見的細胞，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞的主要功能之一是合成膠原蛋白及其他細胞外基質(zhì)，在組織器官纖維化過程中發(fā)揮重要作用。

細胞特性：

1）組織來源于實驗動物大鼠的正常胃組織。

2）細胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。

3）經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF 原代成纖維細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素9(IL-9)檢測試劑盒 ，英文名： IL-9 ELISA Kit

Mouse ierleukin 12 (IL-12/P70) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P70)檢測試劑盒

ELISA 小鼠GRO(mouse GRO)  進口分裝

CLIAKitfori-PTH(HumaniactParathormone)ELISAKit人全段甲狀旁腺素

通用型非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitLBP大鼠脂多糖結(jié)合蛋白

RETN重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

白細胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2(LAIR2)重組蛋白 Recombinant Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 2 (LAIR2)

MERTK重組人 MERTK / Mer (aa 578-872) 蛋白 Protein

EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白

REG1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 0.5mgAnnexin A 膜粘連蛋白 A抗原

EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白

JAM2重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

CD59 Protein Rat 重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ADIPOQ重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠肌肉生長抑制素/肌抑素(MSTN)檢測試劑盒 96T/48T

Rat Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)檢測試劑盒

Humandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit 人降解加速因子(DAF)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-livercellmembraneaibody,LMA檢測試劑盒人抗肝細胞膜抗體(LMA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20次

HumanVaricellazostervirusIgG，VZV-IgGELISAKit人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠胃黏膜成纖維細胞小鼠白介素-23(mouse IL-23)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠白介素-27(mouse IL-27)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠胰島素(mouse Insulin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。