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當(dāng)前位置:上海一研生物科技有限公司>>ELISA檢測試劑盒>>其它類ELISA檢測試劑盒>> 48T/96T24-羥基ELISA檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號48T/96T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時間:2021-04-29 15:27:45瀏覽次數(shù):482次
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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
24-羥基ELISA檢測試劑盒 | 24-hydroxy Cholesterol | EY-E98946 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
標(biāo)本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨,該過程需在冰上進(jìn)行(有條件實驗室可選用機(jī)器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標(biāo)本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
操作步驟:
夾心法,一般的操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);
洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進(jìn)行鍵結(jié);
洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結(jié);
洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果;
間接法,一般的操作步驟為:
將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)。
洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結(jié)。
洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器測定塑膠盤中的吸光值,以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量。
競爭法,其操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體
加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)
加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié),即所謂競爭法之由來。
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2)規(guī)范包被操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3)的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4)適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5)可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等。
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