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ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
產品名稱:腸腺病毒ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Enteric adenovirus
產品貨號:EY-E99351
產品規格:48T/96T
產品保存:2-8℃,有效期6個月
主要組成成分:試劑
性狀:液體
產品規格:96T/48T
96T指可以做94個標本,2個標準對照
48T指可以做47個標本,1個標準對照
96T-84個樣本
48T-42個樣本
待檢樣本:體液,血清,血漿,細胞培養上清液,尿液,組織勻漿,心房水標本等等。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注意事項
1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7)底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
羊抗雞IgG-FITC0.3ml支
伊紅染液500ml瓶
圓蓋玻片 直徑24mm100片盒
Teamethylpyrazine 川芎嗪1124-11-420mg
瑞氏染液50ml瓶
Microcystin-LR 微囊藻毒素LR101043-37-250μg
Fraxetin 秦皮素574-84-520mg
Aactylon 蒼術酮6989-21-520mg
Phytic acid 植酸83-86-320mg
Norisoboldine 去甲異波爾定23599-69-110mg
激光共聚焦細胞培養皿35mm-10(10個/包)35mm包
30ml親和層析柱 (2.3×10)30ml個
對硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷100mg瓶
K-Carrageenan Karra Type k-卡拉膠25g瓶
Picolinic acid 2-吡甲酸25g瓶
腸腺病毒ELISA檢測試劑盒人酸性成纖維細胞生長因子(AFGF/FGF1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit
人氨肽酶(AAP)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human AAP (Alanine Aminopeptidase) ELISA Kit
人成纖維細胞生長因子19(FGF19)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit
人FMS樣激酶3配體(Flt3L)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human Flt3L (FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) ELISA Kit
人成纖維細胞生長因子21(FGF21)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human FGF21 (Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit
人卵泡抑素(FST)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human FST (Follistatin) ELISA Kit
人鐵調素(Hepc)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human Hepc (Hepcidin) ELISA Kit
人生長停滯特異性蛋白6(Gas6)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human Gas6 (Growth Arrest Specific Protein 6) ELISA Kit
人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human G-CSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) ELISA Kit
人生長分化因子15(GDF15)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human GDF15 (Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit
人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human GM-CSF (Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit
人可溶性糖蛋白130(sgp130)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human sgp130 (soluble Glucoprotein 130) ELISA Kit
人肝細胞生長因子(HGF)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit
人β干擾素(IFN-β)酶聯免疫吸附測定試劑盒 Human IFN-β (Interferon Beta) ELISA Kit
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