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褐球固氮菌說明書

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更新時間:2021-04-22 11:01:06瀏覽次數:1603次

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 褐球固氮菌說明書

 Azotobacter chroococcum

 EY-J963217

資源名稱: 褐球固氮菌

種屬: Azotobacter chroococcum

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

應用領域: 研究;。固氮菌,細菌肥料。

培養基: 固氮培養基(Azotobacter Medium):酵母提取物 0.5g, 20.0g,KH2PO4 0.2g,K2HPO4 0.8g,MgSO4.7H2O 0.2g,CaSO4·2H2O 0.1g,FeCl3 微量,Na2MoO4·2H2O 微量,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.2。

生長條件: 25~28℃,好氧。

生長特性: 卵圓形細胞,Gˉ ,常成對。周生鞭毛運動,無芽孢。好氧,化能異養型。接觸酶陽性。利用淀粉、。能利用鹽、氨和氨基酸作為氮源。在含一種有機碳源的無氮培養基中能固定分子氮。

存儲條件: 真空冷凍干燥法

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低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備 
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備 
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備 
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
Yarrowia│lipolytica 中文名稱:解脂耶氏酵母Yarrowia│lipolytica提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:石油發酵制檸檬及異檸檬。培養方法培養基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:≥98%

Aspergillus│candidus 中文名稱:白曲霉Aspergillus│candidus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:釀酒糖化菌。培養方法培養基:CM0076生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98%

Monascus│anka 中文名稱:紅曲紅曲菌Monascus│anka提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:紅色素。培養方法培養基:CM0085生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98%

Lactobacillus│Coryniformis subsp. coryniformis 中文名稱:棒狀乳桿菌棒狀亞種Lactobacillus│Coryniformis subsp. coryniformis分離基物:泡菜(蘿卜,豇豆,白菜,黃瓜)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:泡菜、乳制品、果蔬制品等。培養方法培養基:CM0006生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:99%

Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus 中文名稱:唾液乳桿菌楊素亞種Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus分離基物:泡菜(蘿卜,木瓜)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:發酵泡菜、果蔬制品、飼料等。培養方法培養基:CM0006生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:99%

Lactobacillus│viridescens 中文名稱:綠色乳桿菌Lactobacillus│viridescens分離基物:泡菜(木瓜,黃瓜,蘿卜,苦耳瓜)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:發酵制泡菜、果蔬制品、飼料等。培養方法培養基:CM0006生長條件:30~32℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:99%

Propionibacrium│jensenii 中文名稱:詹氏丙桿菌Propionibacrium│jensenii分離基物:窖泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產丙,釀酒、降酯用。培養方法培養基:CM0286生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:98%

Saccharomyces│ellipsoideus 中文名稱:橢圓酵母Saccharomyces│ellipsoideus提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:甘油。培養方法培養基:CM0077生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:1.00mg/ml
褐球固氮菌說明書MR-VP培養基人表皮角質細胞-新生原代上皮細胞培養特制添加劑AGEs cool article(advanced glycosylation end products cool article)  晚期糖基化終末產物蛋白對照品

察氏培養基人表皮角質細胞-原代內皮細胞培養特制添加劑ET-1(Endothelin-1)  內皮素-1(蛋白多肽 活性蛋白)

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA人表皮角質細胞-胎兒原代平滑肌細胞培養特制添加劑GRGDS peptide  粘附多肽GRGDS

結晶紫中性紅膽鹽瓊脂人表皮黑色素細胞-淺色素原代成纖維細胞培養特制添加劑PACAP(1-38 Peptide)  腺苷環化酶激活肽 1-38(全蛋白)

產培養基人表皮黑色素細胞-中色素原代心肌細胞培養特制添加劑MBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86)  髓鞘性蛋白(多肽抗原)

西蒙氏枸櫞鹽瓊脂人表皮黑色素細胞-深色素原代表皮角化細胞培養特制添加劑Bursin  囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽

腸道菌計數瓊脂(VRBDA)人表皮黑色素細胞-原代系膜細胞培養特制添加劑NPY ( Neuropeptide Y)1-36  神經肽 Y(1-36多肽)

菌種保存培養基人表皮黑色素細胞-胎兒原代肝實質細胞培養特制添加劑Leupeptin   亮抑酶肽
綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
2)按比例配制培養材料;
3)導入曝氣,進行繁殖培養;
4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
5)分離并檢測;
6)取液儲存;通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以內,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。

 

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