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肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292

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所  在  地上海市

更新時間:2021-04-07 20:13:59瀏覽次數:1070次

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公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292

貼壁生長

EY-X63385

細胞名稱  肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292
形態特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞株源自肺支氣管黏液上皮樣癌的淋巴結轉移灶;先用成份限定的培養基分離得到,然后換成含血清的培養基培養。培養條件下該細胞保留了黏液上皮的特性,可從其超微結構的表現和多種鱗狀上皮分化標記的表達而判斷。該細胞支持HBV的生長,脫羧酶陰性。該細胞可以作為篩選模型,將人類亞基因組片段轉染入細胞來研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌發生中的作用。該細胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋紅染色陽線,但神經絲三聯蛋白陰性。

培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。

傳代情況: P84

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養法(-)
?
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用4-溴-2-甲基吡啶Human SCNN1A ELISA Kit
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣;BOS-6注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用4-溴-2-甲基吡啶Human SCNN1G ELISA Kit
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣;BOS-5拉丁屬名: Bacillus megaterium3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯Human SCO1 ELISA Kit
婆羅門牛皮膚成纖維樣;BOS-4拉丁屬名: Fusarium oxysporum3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯Human SCP2 ELISA Kit
婆羅門牛皮膚成纖維樣;BOS-3拉丁屬名: Pseudomonas nitroreducens3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯Human SCO2 ELISA Kit
大額牛皮膚成纖維樣;BOS-2拉丁屬名: Bacillus  zhejiangensisMethyl 6-hydroxy-5-nitropyridine-3-carboxylateHuman SCNN1G ELISA Kit
猴yuan拉丁屬名: Ganoderma  sinense1-對磺酰咪唑Human SCO2 ELISA Kit
非洲綠猴腎;GL-37拉丁屬名: Aspergillus  flavus1-對磺酰咪唑Human SCO1 ELISA Kit
非洲綠猴腎;VERO-76注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(S)-(+)-1,2-異亞基甘油Human SCLY ELISA Kit
猴腎;vero IgRCD4-注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(S)-(+)-1,2-異亞基甘油Human SCT(Secretin) ELISA Kit
猴腎;Vero IgCD4拉丁屬名: Ophiocordyceps  sinensis(S)-(+)-1,2-異亞基甘油Human SCMH1 ELISA Kit
長尾綠猴腎;4647注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用4,6-二甲基-2-巰基嘧啶Human SCML1 ELISA Kit
長尾綠猴

肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292犬孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒HSP-40ELISAKit產品規格:48T/96T。

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操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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