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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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培養(yǎng)基品類大全

時(shí)間:2016/4/11閱讀:1619
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1、營(yíng)養(yǎng)瓊脂(普通瓊脂)
成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏湯) 100毫升
   瓊脂(視天氣,瓊脂質(zhì)量而定)
制法:將上物加熱溶解,補(bǔ)足水,調(diào)ph至7.6,過濾分裝121℃,高壓滅菌15分鐘。
用途:作普通瓊脂平皿。

2、血瓊脂平板(BA)
制法:取營(yíng)養(yǎng)瓊脂(PH7.6),加熱使其溶解待冷至45-50℃,以滅菌操作于每100毫升營(yíng)養(yǎng)瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻,立即傾注于平板或分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?br />用途:1. 一般棉拭子均接種此培養(yǎng)基。
   2.尿液,膿液
   3.分離細(xì)菌標(biāo)本用。

3、基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (肉膏湯BB)
成份:蛋白胨 10克     牛肉膏 5克 
   氯化鈉 5克     水     1000毫升
制法:將以上各物稱好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,過濾分瓶,121℃高壓滅菌,20分鐘備用。
用途:1 作耐藥試驗(yàn),增菌用分裝小管。
   2 作普通瓊脂斜面。

4、血液培養(yǎng)基(大管肉湯培養(yǎng)基)
成份:1 新鮮牛肉浸液 1000毫升 
   2 PABA(對(duì)氨基苯甲酸〔相當(dāng)于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升
   3 MgSO4 [相當(dāng)于0.493/100毫升]    49.3% 1毫升
   4 枸椽酸鈉                      0.3g
制法:1 將1號(hào),4號(hào)混合液,2號(hào),3號(hào)液分裝高壓滅菌。
   2 取滅菌1,4號(hào)混合液用無菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行無菌試驗(yàn)三天方可使用。
用途:作血,骨髓培養(yǎng)用。

5、腸道桿菌培養(yǎng)基(伊紅美蘭瓊脂)
成份: 蛋白胨 10克       乳糖     10克
       氯化鈉 5克       瓊脂     25(22)克
       水    1000毫升     2%伊紅溶液20毫升
       0.5%美蘭溶液 20毫升
制法:將蛋白胨,氯化鈉瓊脂稱好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4過濾,補(bǔ)足失水,加入2%伊紅溶液20毫升,0.5%美蘭溶液20毫升,(115℃高壓20分鐘),冷卻至50℃左右傾注平板,凝固后存冰箱備用。(高壓以后方可再加乳糖)

用途:用作分離沙門氏,志賀氏菌屬,也作菌群調(diào)查。
                         1

6、羅文斯坦培養(yǎng)基
成份:磷酸二氫鉀     2.4克        0.24克
   枸椽酸鈉    0.6克       天門冬素 3.6克
   純甘油(丙三醇) 12毫升       水     600毫升
   馬鈴薯粉    30克           雞蛋 1000毫升(約3公斤)
   2%孔雀綠水溶液 20毫升    
制法:1 除雞蛋外(還有孔雀綠)。可將其它物品稱好,放入大三角瓶包扎好,高壓滅菌。
   2 雞蛋用75%酒精泡30分鐘,滅菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的滅菌三角燒瓶?jī)?nèi)充分將雞蛋搖散。
   3 將各成份按比例配好,分裝每管約5毫升。
   4 間歇滅菌*次90℃1小時(shí),第二次80℃半小時(shí),第三次80℃半小時(shí)(或放85℃烤箱內(nèi)連續(xù)二次)。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn): 1 滅菌試驗(yàn)合格。
         2 接種結(jié)核桿菌要求兩星期生長(zhǎng)良好。
用途:作結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)用。

7、結(jié)核半固體培養(yǎng)基
成份:    19克                0.6克
   磷酸二氫鉀    2.5克       天門冬素 5克
   1%孔雀綠    1.5克           甘油    20毫升
   吐溫80(10%) 5毫升           水    1000毫升
   枸椽酸鈉       2.5克           動(dòng)物血清 100毫升
   瓊脂           1.5克(80小時(shí)用甲醇去脂)
   1%孔雀綠    0.78毫升    吐溫80(10%) 5毫升
   加動(dòng)物血清     100毫升
制法: 1 除血清外將上述藥品均稱好,放入煮沸溶解,調(diào)PH7。2
   2 分管(每管約10毫升)包扎好,高壓,121℃半小時(shí)滅菌。
   3 待冷后無菌法加無菌血清(綿羊血或兔血)每管約1毫升備用。
   4 去除瓊脂方法:取瓊脂若干或于三角燒瓶中加甲醇于瓊脂1毫升用塞密封,放37℃溫浴80小時(shí),每天搖動(dòng)一次,冷卻后到時(shí)取出用濾紙過濾,待瓊脂自然冷卻后備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1無菌實(shí)驗(yàn)合格。www.med126。。com
      2瓊脂硬度合適而清亮。
      3接種標(biāo)準(zhǔn)結(jié)核桿菌用,強(qiáng)度合適即可用。
用途:培養(yǎng)結(jié)核桿菌用。

8、亞碲酸鉀血瓊脂平板
成份:瓊脂基礎(chǔ) 100毫升    1 0%葡萄糖     2毫升
   1%亞碲酸鉀 4.5毫升    綿羊血    10毫升
制法:1將瓊脂基礎(chǔ)溶解好,加入羊血。
   2馬上加熱使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升與1%亞碲酸4.5毫升混合后倒入無菌平板,凝固后存冰箱備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):接種白喉?xiàng)U菌生長(zhǎng)良好,其它革蘭氏陰性菌均抑制生長(zhǎng)。
用途:供培養(yǎng)及鑒別白喉?xiàng)U菌用。    
                     
9、米培養(yǎng)基
成份:白米    20克           水     1000毫升
   瓊脂    20克       吐溫80 10毫升
制法:1將20克米加水200毫升煮沸45分鐘,煮時(shí)將容器蓋好。
   2用紗布過濾,只要米湯,不要飯,加水至1000毫升。
   3加瓊脂20克,吐溫-80 10毫升煮溶,分裝中型管(每管約3毫升),包扎好,高壓,121℃半小時(shí),消毒備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1滅菌。
      2要求清亮。
      3接種白色念珠菌17-24小時(shí)生長(zhǎng)良好,并產(chǎn)生厚膜孢子。
用途:培養(yǎng)白色念珠菌用。

10、蛋白胨水培養(yǎng)基
成份:蛋白胨 1克    氯化鈉     0.5克
   水加至 100毫升     PH調(diào)至     7.8
制法:把以上各物稱好溶于水,調(diào)節(jié)PH7.6分裝消毒備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1 放置37℃無菌生長(zhǎng)。
      2 接種大腸桿菌24小時(shí)生長(zhǎng)良好。
      3 可作中國(guó)蘭平板基礎(chǔ)液。
      可作靛基質(zhì)基礎(chǔ)液(作此試驗(yàn)需要蛋白胨)。

11、血培養(yǎng)基
成份:蛋白胨 10克           牛肉膏     5克
   氯化鈉 5克           葡萄糖     3克
   枸椽酸鈉 3克           MgSO4。7H2O 20毫升
   0.5%PABA 10毫升     酵母浸液 10毫升 0.2克(2%過濾)
   *酚紅0.4% 6毫升    水     1000毫升
       瓊脂     0.5克    
*:作大BB,小BB時(shí),不要加酚紅和瓊脂。
制法:1、除PABA、、酚紅外均稱好煮化調(diào)PH7.4
   2、調(diào)好PH后再加酚紅。
   3、、PABA另外無菌再加入(亞細(xì),小BB)

12、沙氏培養(yǎng)基
成份:蛋白胨     1克                       水     100毫升
   瓊脂     1.5克(瓊脂粉1克%)     葡萄糖或麥芽糖 4克
                        
制法:1將上述物質(zhì)稱好,放入水中煮沸溶解(不必調(diào)PH即有5左右)分中號(hào)試管(約4毫升)包扎,高壓115℃20分鐘。
   2 趁熱斜好,凝固備用。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn):1無菌試驗(yàn)合格。
      2接種霉菌比在其它培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,其它菌生長(zhǎng)不好。
用途:作分離培養(yǎng)霉菌用。
注意:1 接種臨床新鮮標(biāo)本可先加1-2滴70%酒精讓干后再接種于含12.5%沙氏斜面培養(yǎng)基上。 
   2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麥芽糖。

13、肉渣培養(yǎng)基
成份: 牛肉渣       牛肉浸液(牛肉膏)
制法:將做牛肉浸液的牛肉渣,裝入試管,高約3毫米,加入牛肉浸液或牛肉膏湯(PH7.6)約5毫升,比肉渣高一倍,液面上加入已溶解的凡士林,高約0.5厘米(不加也可),121℃高壓滅菌20-30分鐘后保存于冰箱內(nèi)備用 。
用途:用于厭氧菌培養(yǎng)。
注意:如無肉渣也可用牛、羊血等代替,將血塊先放入水內(nèi)煮沸,取出成小塊,血塊在加熱后搖勻成碎顆粒狀。

 

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