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人-細胞素elisa檢測試劑盒組成及試劑配制
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生wu素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1、酶聯板:一塊(96孔;48孔)
2、標準品:2瓶
3、樣品稀釋液:1×20ml/瓶
4、生wu素標記抗體稀釋液:1×10ml/瓶
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液:1×10ml/瓶
6、生wu素標記抗體:1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素:1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液:1×10ml/瓶
9、濃洗滌液:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液:1×10ml/瓶
實驗材料與試劑配制
1、儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2、洗液的配制:按比例配制洗液備用。
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