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胎牛血清
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【牛血清】是細胞培養中重要的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養。
牛血清分為胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清。
【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發育因子,非常適合各種細胞的培養,一旦胚胎發育*這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。
【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):采自出生一天~一周內的新生牛;
【小牛血清】(Calf Serum):采自出生10-30天的小牛;
【成牛血清】(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。
所有血清出廠前均應經過嚴格質控,并附詳細《檢測報告》,
如pH值、滲透壓、內毒素、病毒檢測、促細胞生長能力、無菌等檢查。
其中,由于內毒素直接參與細胞凋亡,對細胞培養結果影響較大,且不同批次的血清,內毒素差異又不易控制。
有下列情況者,對血清內毒素應格外留意篩選:
1.養干細胞時,干細胞對內毒素非常敏感,如果血清中內毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。
2.養免疫細胞時,過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。
3.基因敲除相關的細胞實驗,培養的細胞要盡可能保持其原始狀態,任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續的實驗結果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內毒素對實驗至關重要;
4.原代培養、雜交瘤融合、細胞轉染,或者肝細胞、神經細胞、內皮等難養細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內毒素,是保證實驗順利的步。
5.實驗室有些細胞,需要長期培養、長期凍存,或者經常復蘇、經常培養的,血清會經常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應該選用更低內毒素的血清,以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。
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