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ELISA標本如何制備和貯存？

閱讀：112發布時間：2015-12-16

檢測可溶性蛋白：根據產品說明書制備血清、血漿標本，由于有些樣品對溫度敏感極易喪失活性，應盡快分離并分裝（一般300～500ul/管），大多數標本收集和實驗在同一天應貯存在2～8℃。若無法立即測定，應貯存在-70℃，標本貯存時間一般不宜過長，避免反復凍融。使用前將標本平衡至室溫，融化標本嚴禁使用水浴鍋。凍存后或冷藏時間過長的標本可能會出現沉淀或小凝集塊，應在實驗前離心或過濾（0.45um濾膜）標本，體積少的標本不建議過濾。所有標本的收集要使用無菌管，在無菌/半無菌條件下操作防止污染。

血清：將血液在室溫凝集10～15分鐘，1500g離心20～30分鐘，小心吸取血清。

血漿：按試劑盒中的說明書選擇抗凝劑。收集血液時，輕輕搖動試管使抗凝劑與血液充分混合。將血液在室溫保存 10～15分鐘，1500g離心15～20分鐘，小心吸上層血漿。

尿液：將尿液收集在無菌的容器內。1500g離心10～15分鐘或過濾（0.45um濾膜）去除雜質。注意：對于尿液標本實驗的回歸系數可能發生變化。

細胞培養上清液：1500g離心10～15分鐘去除細胞和細胞殘渣。若使用常規典型的培養基，應制備兩條標準曲線，一條使用標準品稀釋液/或實驗緩沖液配制標準品，另一條以細胞培養基配制標準品。若兩條標準曲線的變化范圍在10%內，實驗結果可用任一曲線分析。

檢測細胞相關和細胞內蛋白：細胞相關蛋白和其它細胞內蛋白在ELISA實驗前需要對標本進行處理將目的蛋白釋放出來。

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