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鈣濃度檢測試劑盒說明書
分光光度法 50管/48樣
測定意義:
血鈣幾乎全部存在于血漿中,所以血鈣主要指血漿鈣。血漿鈣有離子鈣和結合鈣兩種形式,其中只有離子鈣直接起生理作用,它與結合鈣處于動態平衡,并受血液pH的影響。血鈣水平與多種重要的生理功能相關,過高或過低都會影響正常生理功能。本試劑盒用于檢測血液中游離鈣濃度。
測定原理:
在強堿溶液中游離鈣與GBHA反應生成紅色鈣-GBHA復合物,在520 nm有吸收峰;通過測定520 nm吸光度,計算游離鈣濃度。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、無水甲醇、丙酮和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體×1瓶(空瓶,試劑自備)。取30 mL試劑瓶。依次加入27 mL無水甲醇和3 mL丙酮,蓋緊混勻即可。
標準液:液體×1瓶,3μmol/mL,4℃保存。
血鈣濃度測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min以上,調節波長到520 nm,蒸餾水調零。
2. 空白管:取1mL玻璃比色皿,依次加入蒸餾水50μL,試劑一200 μL,混勻;再加入試劑二200μL,混勻;zui后加入試劑三400μL,混勻;靜置5min后于520 nm測定吸光度A空白管。做一個空白管即可。
3. 標準管:取1mL玻璃比色皿,依次加入標準液50μL,試劑一200 μL,混勻;再加入試劑二200μL,混勻;zui后加入試劑三400μL,混勻;靜置5min后于520 nm測定吸光度A標準管。做一個標準管即可。
4. 測定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入血液樣品50μL,試劑一200 μL,混勻;再加入試劑二200μL,混勻;zui后加入試劑三400μL,混勻;靜置5min后于520 nm測定吸光度A測定管。記為A測定管。
注意:加試劑三后,應該在30 min內完成該管的測定。
血鈣濃度計算:
血鈣含量(μ mol /dL血液)= [C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]×V樣品總=300×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)
C標準液:3μmol/mL; V樣總:樣品總體積,1 dL=100 mL。
注意事項:宜早晨空腹采血,并且采血后應該盡快完成測定。
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