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僅供研究用

貨號(hào)：QYS-234052
果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 樣

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

果糖是一種zui為常見的己酮糖，是葡萄糖的同分異構(gòu)體，以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中，能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖。果糖是zui甜的單糖，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健品生產(chǎn)中。
果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書測定原理：

在酸性條件下果糖與*反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，在 480nm 下有特征吸收峰。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、蒸餾水

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100ml×1 瓶，4℃保存；
試劑一：1mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)液 10mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 40ml×1 瓶，4℃保存；
試劑三：液體 15ml×1 瓶， 4℃保存；
試劑四：粉劑 0.5g×1 瓶，常溫保存。
果糖提取：

稱取 0.1~0.2g 樣本，常溫研碎；加入 1mL 提取液，適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中；置于 80℃水浴鍋中 10min（蓋緊，以防止水分散失），振蕩 3~5 次，冷卻后，4000g，25℃離心 10min，取上清；加入少量（約 2mg）試劑四，80℃脫色 30min（蓋緊，以防止水分散失）；再加入 1mL 提取液，4000g，25℃離心 10min，取上清液測定。
果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書測定步驟：

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 480nm，蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定（在 1.5mL EP 管中依次加入下列試劑）：
試劑（μL）    空白管    標(biāo)準(zhǔn)管    測定管
樣本            100
試劑一        100    
蒸餾水    100        
試劑二    700    700    700
試劑三    200    200    200
            

混勻，95℃水浴反應(yīng) 30min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后測定 480nm 處光吸收值，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管分別記為 A1、A2 和 A3。

果糖含量計(jì)算：

1、果糖含量（mg/mg prot）=（C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1）×(A3－A1)÷(A2－A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷

（A2-A1) ÷Cpr

果糖（fructose ，F(xiàn)T）含量試劑盒說明書此法需要自行測定蛋白濃度。

2、果糖含量(mg/g 鮮重）=（C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1）×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= 2× (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1mg/mL；V1：加入樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，2mL；

Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。
注意：zui低檢測限為 100ng/g 鮮重或 1ng/mg prot