劉經理
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產品名稱:人大細胞肺癌細胞
英文名稱:NCI-H460[H460]
培養基:RPMI-1640*培養基:90%RPMI-1640+10%FBS
形態:上皮細胞樣,多角形,圓形緊密排列
生長條件:培養溫度37℃;氣體環境5%CO2+95%空氣
生長特性:貼壁生長
儲存方式:液氮
傳代方法:
復蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速沒入 37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以 1 分鐘內全部 溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有 9ml *培養基的離心管內,1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘,棄去 上清液,用 1-2mL *培養基重懸細胞。③然后將細胞懸液加入到含有 5-6mL *培養基的 T25 瓶中,放入培養箱培養。 細胞傳代:①將舊培養液吸除,PBS 清洗兩遍后,加入 1-2mL 胰霉(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況, 在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續 消化),直接吸掉胰霉,加入 5-6 毫升*培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中,添加適當的*培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。④注意培養基 pH 值變化和細胞密度,定期換 液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%-90%時,重復傳代操作或者凍存。
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