ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
進行檢測時，樣品中的受檢物質（抗原或抗體）與固定的抗體或抗原結合。通過洗板除去非結合物，再加入酶標記的抗原或抗體，此時，能固定下來的酶量與樣品中被檢物質的量相關。通過加入與酶反應的底物后顯色，根據顏色的深淺可以判斷樣品中物質的含量，進行定性或定量的分析。
由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的靈敏度。
ELISA的基本類型
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。這種測定方法中有3種必要的試劑：
1. 固相的抗原或抗體；
2. 酶標記的抗原或抗體；
3. 酶作用的底物。
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