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熱原檢查法
由于家兔對熱原的反應與人基本相似,目前家兔法仍為各國藥典規(guī)定的檢查熱原的法定方法。《中國藥典》2005年版規(guī)定的熱原檢查法系將一定劑量的供試品,靜脈注入家兔體內,在規(guī)定時間內,觀察家兔體溫升高的情況,以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定。檢查結果的準確性和一致性取決于試驗動物的狀況、試驗室條件和操作的規(guī)范性。家兔法檢測內毒素的靈敏度為0.001μg/ml,試驗結果接近人體真實情況,但操作繁瑣費時,不能用于注射劑生產過程中的質量監(jiān)控,且不適用于放射性藥物、腫瘤抑制劑等細胞毒性藥物制劑。
細菌內毒素檢查法
細菌內毒素檢查法系利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產生的細菌內毒素,以判斷供試品中細菌內毒素的*是否符合規(guī)定的一種方法.細菌內毒素的量用內毒素單位(EU)表示。
細菌內毒素檢查包括凝膠法和光度測定法兩種方法,前者利用鱟試劑與細菌內毒素產生凝集反應的原理來檢測或半定量內毒素,后者包括濁度法和顯色基質法,系分別利用鱟試劑與內毒素反應過程中的濁度變化及產生的凝固酶使特定底物釋放出呈色團的多少來測定內毒素。
鱟試劑法檢查內毒素的靈敏度為0.0001μg/ml,比家兔法靈敏10倍,操作簡單易行,試驗費用低,結果迅速可靠,適用于注射劑生產過程中的熱原控制和家兔法不能檢測的某些細胞毒性藥物制劑,但其對革蘭陰性菌以外的內毒素不靈敏,目前尚不能*代替家兔法。
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