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實(shí)驗(yàn)方法原理 酶斑點(diǎn)法(薄膜EIA)
實(shí)驗(yàn)原理:酶班點(diǎn)測尿液中β-HCG的方法是一種單克隆與多克隆抗體相結(jié)合的酶聯(lián)免疫測定法,其原理為:反應(yīng)體系為一張經(jīng)抗β-HCG抗體處理的膜,當(dāng)尿液通過上層濾膜到達(dá)反應(yīng)膜時,尿被中有HCG分子便與膜上的抗β-HCG抗體結(jié)合,于是當(dāng)加入酶標(biāo)HCG抗體復(fù)合物后,便與膜表面HCG分子上的另一個暴露位點(diǎn)呈特異性的結(jié)合,此時,將濾膜剝開,加入酶的底物顯色溶液.使復(fù)合物著色,屆時不同項(xiàng)色的點(diǎn)便可出現(xiàn).
試劑、試劑盒 底物顯色溶液HCG標(biāo)準(zhǔn)液酶標(biāo)-β-HCG抗體復(fù)合物
實(shí)驗(yàn)步驟
一、實(shí)驗(yàn)試劑:
1、酶標(biāo)-β-HCG抗體復(fù)合物
2、底物顯色溶液
3、HCG標(biāo)準(zhǔn)液
4、陰性對照
5、反應(yīng)體系:
包被的抗HCG抗體,以上試劑應(yīng)貯存2-8℃冰箱內(nèi)不同批號試劑不要相互混用.當(dāng)試劑盒從冰箱取出使用時,需置室度(18-3O℃)停放20min.
實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集:任何隨意尿液均可運(yùn)用該法測,但以*次晨尿?yàn)楹茫占蛞簶?biāo)本可用任何干凈、干燥的塑料或玻璃容器如果不能立即對標(biāo)本進(jìn)行立即對標(biāo)本進(jìn)行測定,可放于2-8℃冰箱內(nèi)48小時標(biāo)本在測試前須放置室溫(18-30℃)停放20分鐘,不必,也不必過濾.
二、實(shí)驗(yàn)方法:
將尿樣或HCG標(biāo)準(zhǔn)被充滿反應(yīng)體上端的小池,待*吸收再加3清醒標(biāo)HCG抗體復(fù)合物于小池中法膜上,待*吸收1分鐘后用液管尖剝離濾膜,zui后加3個底物顯色溶液于反應(yīng)膜上,觀察膜上結(jié)果,具體操作詳見說明書.
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