一、原理：
ELISA試劑盒抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清，一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。
一種抗原能否引起抗體生成反應，一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定（Antigenicdeterminant），另一方面取決于機體的免疫狀態，當具備以上兩個條件后，抗體生成將遵循抗體生成的一般規律——初次反應和再次反應。
抗原的種類繁多，包括天然的蛋白質抗原和細胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一般*抗原免疫動物需加用佐劑，尤其在使用可溶性抗原時，以期得到價的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物質需先通過人工的方法與蛋白質載體連接后再與佐劑混合免疫動物，方可獲得理想的免疫效果。使用佐劑后可增加抗原的免疫原性和延長抗原在機體內存留的時間，從而改變了抗原原有的免疫原性。

二、目的：
1、了解抗血清制備的基本過程：
2、掌握抗血清的收集和保存方法。

三、材料：
1、金屬編號牌（對動物作標記錄）或染料;
2、1毫升，5毫升、20毫升注射器;
3、*頭（9#，12#），卡價苗針頭（41/2# — 51/2#）;
4、滅菌平皿，疫苗瓶，*瓶，皮塞以及吸管，脫脂棉;
5、卡介苗（75mg/ml）;
6、抗原（小鼠血清）;
7、*溶液，*溶液和5%葡萄糖溶液;
8、液體石臘（醫用），羊毛臘（配制佐劑用）;
9、滅菌生理鹽水，消毒用酒精，2.5%碘酒;
10、1.5%瓊脂，玻板，飯盒（保濕、保濕作用）;
11、實驗動物（家兔）。
12、分離血清
必須在無菌條件下進行，待收集于平皿或三角瓶內的血液凝固之后，用無菌滴管在無菌環境（例如超凈工作臺）中把血塊與瓶壁剝離后，放入37℃，1～2h取出后放入4℃，使血清充分析出（不能冰凍，否則產生溶血），經離心沉淀分出血清，放進低溫冰箱保存。使用前必須經過簽定合格后再分裝保存備用。
13、ELISA試劑盒抗血清的保存
1）經簽定合格后的抗血清，以1:100比例加入1%的硫柳汞或5%的疊氮鈉，使其zui后濃度分別為0.01%或0.05%。
2）用無菌滴管將抗血清分裝小管，每管裝1ml左右。
3）-20℃以下保存，可保存2年以上。
4）如有條件可將血清冷凍干燥保存于4℃以下，保存時間更久

四、注意事項
1、動物的免疫反應存在著個體差異，甚至有人報告不同品種動物一次免疫后產生的抗體的差別可高達500倍，所以制備抗血清時不能只免疫一只動物，一般免疫3～4只，因為有的動物可能產生抗體效價很低或不產生抗體，免疫反應好的動物所能提供的抗體往往高于一般動物3～4倍。
2、為制備單價特異性高的抗血清，所用抗原純度越高越好，因此，在純化抗原過程中應盡量除去可能存在的雜蛋白，這樣可以省去許多時間來吸收抗血清中的非特異性抗體。
3、要制備價的抗體，必須要加佐劑（一般采用*福氏佐劑），加佐劑后免疫動物，抗體效價至少可增加5倍。但也應考慮到，如果抗原中有微量的雜蛋白存在，即使0.005mg，亦可因有佐劑而產生非特異性的抗體，所以要根據實驗需要和抗原的純度適當地使用佐劑。
4、制成的抗原乳劑是否為油包水乳劑應進行檢查，否則會影響免疫效果，如不是油包水乳劑，應重新制備。
5、當抗原量過少不易提純時，可采用抗原抗體在瓊脂擴散中形成的沉淀線直接免疫動物制備抗體。
6、ELISA試劑盒抗血清效價一般以抗血清稀釋倍數表示。血清效價的檢測方法很多，靈敏度各不同，因此在表示抗血清效價時，應標明檢測方法。另外，在沉淀反應中，出現沉淀時的抗原、抗體比例有一較大的范圍，如用不同濃度的抗原測定效價時，結果會因此有別，所以在測定抗血清效價時，需注意抗原的濃度。
7、分裝保存的抗血清應注明抗血清的名稱，效價，制備日期以及包裝量。