小鼠腎小球系膜細胞(SV40-MES-13)
細胞介紹
該細胞系來源于轉染SV40的轉基因小鼠的腎臟。
細胞特性
1)來源:腎小球,小鼠
2)形態:成纖維細胞樣,貼壁生長
3)含量:>lxl06個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
細胞接受后的處理:
1.收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2.請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養約2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4.如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5.接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得。
細胞用途:僅供科研使用。
小鼠腎小球系膜細胞(SV40-MES-13)
本公司的細胞培養操作規程,供參考
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備培養基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium(CatalogNo_30-2002): Ham'sF12mediumwith14mMHEPES=3:l,即三份的DMEM,1份 Ham'sF12
混合培養基),85%;優質胎牛血清,5%。
2.培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低 于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心 管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培 養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。 第二天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
小鼠腎小球系膜細胞(SV40-MES-13)
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
力口2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37°C培
養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養液后吹勻。
移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行, zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數量分配到凍存管 中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。