人急性淋巴母細胞白血病細胞(M0LT-4)細胞介紹:
該細胞株從一位復發病人的細胞中建立。該病人接受過多種藥物聯合前期*。p53基因的248位密碼子有一個G-A突變。P53不表達,不生成免疫球蛋白或EB病毒。
細胞特性:
1)來源:T淋巴母細胞
2)形態:淋巴母細胞樣,懸浮生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
細胞接受后的處理:
1.收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2.請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養約 2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的*培養基。
4.如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5.接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得。
人急性淋巴母細胞白血病細胞(M0LT-4)本公司的細胞培養操作規程,供參考
1)培養基及培養凍存條件準備:
準備 RPIVM-1640 培養基(RPMI-1640,GIBCO,貨號 11875085),90%;優質
胎牛血清,10%。
培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養箱濕度為70%-80%。
凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培 養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代:如果細胞密度80%-90%,即可進行傳代培養。
人急性淋巴母細胞白血病細胞(M0LT-4)對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加 l-2mL培養液后吹句,將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管 中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人急性淋巴母細胞白血病細胞(M0LT-4)細胞用途:僅供科研使用。