血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當然假設你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS聯絡也不大。不管你是用直接比賽仍是間接比賽，血清的稀釋倍數必定要事先判定，但也不必一點點，你做一個預實驗即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數，即你的比賽ELISA中陰性孔OD在1.0，這樣作出來的曲線比較靈敏。

每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對應的說明書，而每一份說明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋比例，為什么樣本都需求稀釋呢?在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋？有兩個原因：
1）比賽克制比較明顯，應稀釋比賽物；
2）以下降非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。

ELISA試劑盒實驗稀釋血清的進程：
先把蛋白稀釋必定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體判定一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板，再用必定稀釋度的陽性參看血清和陰性參看血清進行孵育后洗刷，再加酶結合物進行反應，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應后別離測定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。