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上海酶聯生物研究所

上海酶聯:應該如何進步ELISA的重現性?

時間:2020-3-27閱讀:247
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免疫檢測法的性表現為單次試驗孔間(批內)的重復性和屢次試驗之間(批間)的重復性。CV值高則表明度低,一般由以下兩個原因形成:移液技能和洗刷技能。 

一:移液技能 

1. 移液時,槍頭應對準孔*,防止接觸孔壁及底部。
2. 移液后悄悄晃動混勻試劑。 

3. 假如您的樣品具有黏性,請預先潤洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時等候片刻使體積平衡后再取出。 

4. 移液不充分或移液體積不均,闡明移液器需求校對。必要時請查看移液器并重新校對。 

5. 加樣時,不同的試劑標準品和樣本間都要保證更換槍頭,防止穿插污染。 

6. 保證運用合適的槍頭。不合適的槍頭無法正確量取吸液和加樣的體積。 

二:洗刷技能 

1. 假如運用自動洗板機或多通道移液器,請保證進出口能正常運作。 

2. zui后一次洗刷后,翻轉酶標板倒出剩余的洗刷液,并在吸水紙上拍干液體。洗板太快或太慢都會降低度。不能讓孔內液體天然風干,需當即進行下一步操作。 

3. 依照闡明書,增加足量的洗刷液至孔內,并保證洗刷*。 

4. 因為洗刷液不是通用的,當試劑盒內的洗刷液用完時,請不要運用其他試劑盒中的洗刷液。如有需求,可聯絡技能支持尋求幫助。 

5. 不要減少洗刷時的浸泡時間或跳過浸泡的步驟。 

6. 依照闡明書上引薦的洗刷次數清洗,隨意改動洗刷次數會影響試驗的準確性。 

三:貯液瓶 

1. 為防止污染,不同的試劑運用不同的貯液瓶。一些試劑或樣本很容易被污染(比如唾液、氧化劑等),請參閱闡明書操作。必要時候采取一些預防措施維護溶液。 

四:封板覆膜 

1. 運用過的封板覆膜可能含有上一步試驗殘留的試劑,假如重復運用會形成孔板污染。建議每一次孵育運用新的封板覆膜。 

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