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血清,指血液凝結后,在血漿中除去纖維蛋白原別離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是供給根本營養物質、供給激素和各種成長因子、供給結合蛋白、供給促觸摸和擴展因子使細胞貼壁免受機械損害、對培養中的細胞的起到某些維護作用。那么應該怎么正確凍結血清?咱們一起來看看吧
辦法一:將冷凍血清從-20℃取出后,放置于4℃冰箱中過夜。次日,將血清轉移到37℃的水浴中,搖動瓶身以加速血清的溶解。
辦法二:直接將血清從-20℃取出后,放置于37℃水浴中,不斷搖晃瓶身使其加速凍結和混勻。
【注】:凍結過程中,如果不晃動瓶身,當溫度超越40℃的時分,血清可能會導致蛋白變性,析出沉積。凍結后不宜在37℃水浴長期放置。
一:血清是否需求滅活?
關于大多數細胞的培養而言,是不需求的加熱滅活的。但在免疫學研究、ES細胞培養、昆蟲細胞和平滑肌細胞培養時引薦運用滅活血清。加熱血清能夠滅活血清中被激活的補體,但一起也會損壞熱不穩定的蛋白。熱滅活血清對細胞的成長只要細小的促進作用,甚至會由于滅活不當,損壞血清的質量,而按捺細胞的成長。
二:血清滅活的方法?
依照正確的凍結方法*凍結血清,使其恢復到室溫。將血清分裝成50mL進行滅活。關于一次需求滅活500mL的操作,能夠將一個相同體積的容器放置在水浴鍋中,中心刺進溫度計,作為參考。當溫度到達56℃時,加熱30min進行滅活。
【注】在血清的加熱和滅活過程中需求不斷地進行搖晃混勻。
三:血清中含有的絮狀沉積是什么?
A:正常血清有時分中會出現一些絮狀的沉積,這些絮狀物一般是纖維蛋白和脂蛋白的沉積,不會影響血清的質量,能夠通過在4℃混勻后靜置1h,400g離心5min去除。
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