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血清保存的六點注意事項
(1)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*凍結的血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的意圖是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非有必要,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會構成血清沉積物明顯增多,并且還會影響血清的質量。補體參加反響有:細胞毒效果, 滑潤肌細胞縮短, 肥大細胞和血小板開釋組胺, 增強吞噬效果, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發作化學趨化和活化。
(2)切勿將血清在37℃放置太久,不然血清會變得污濁,一同血清中的有效成分會破會而影響血清質量。
(3)血清中的沉積物
絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結后血清中纖維蛋白構成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量。可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理。
顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉積物的構成會明顯增多。有些沉積物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞成長,但假如置疑血清質量,則應立即停止使用,替換另一批號的血清。
(4)需求長時刻保存的血清有必要貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超越1個月。因為血清結冰時體積會添加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留必定體積空間,不然易發作污染或玻璃瓶凍裂。
(5)一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一同過濾,切勿直接過濾血清。
(6)瓶裝血清凍結需選用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待悉數溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(當心勿構成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉積的發作。切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍結,這樣因溫度改動太大,容易構成蛋白質凝聚而出現沉積。
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