ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發作。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的機會，只需*靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。這是一個逐步平衡的進程，因而需經分散才干到達反響的結尾。在這以后參加的酶標記抗體與固相抗原的結合也相同如此。這就是為什么ELISA反響總是需求必定時刻的溫育。

elisa試劑盒溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA辦法作反響動力學研究時，實驗標明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經1-2小時，產品的生成可達高峰。為加快反響，可提高反響的溫度，有些實驗在43℃進行，但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反響4℃更為*，在放射免疫測定中多使反響在冰箱中夜，以形成*多的沉積。但因所需時刻太長，在ELISA中一般不予選用。
保溫的辦法除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均選用水浴，可將ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA板應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性杰出的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，*后將ELISA板放在濕紗布上。

濕盒應先放在保溫箱中預溫至規則的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴仍是濕盒溫育，反響板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響，操作時的室溫應嚴厲約束在規則的范圍內，標準室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時可根據說明書的要求操控溫育。室溫溫育時，ELISA板只需平置于操作臺上即可。ELISA試劑盒應留意溫育的溫度和時刻應按規則力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板一起測定。

怎么辦理ELISA試劑盒的質量操控問題。
1、斷定操控的目標；
2、規則操控目標的標準（預期值）；
3、擬定或選擇操控辦法和手法；
4、丈量實踐數據；
5、比較或較對實踐數據與預期值之間的差異，并說明產生這一差異的原因。超出預訂差錯范圍，報警系宣布信號，反應通道中止。
6、采納舉動，解決差異。恢復原狀（原標準狀態）的手法發揮作用。