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上海酶聯生物研究所

真菌的培育方法

時間:2018-1-23閱讀:1332
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真菌的培育方法
1、小塊瓊脂玻片培育法 
用無菌操作法將制好的待用瓊脂平板用無菌接種針或接種環切成大約1cm2的方塊,將其放置于滅菌的載玻片上。將標本或待檢菌接種于瓊脂塊四周邊緣靠上方部位,然后用無菌鑷子取一無菌的蓋玻片蓋在瓊脂上。在無菌平皿內放入少量無菌水和一個無菌U形(或V形)玻璃棒。將此載玻片置于玻璃棒上,蓋上平皿蓋培育。每日用肉眼和顯微鏡調查孢子和菌絲的特色。
2、鋼環法
(1)資料:白假絲酵母菌、沙保弱培育基、無菌玻片、蓋玻片、鋼環(帶有缺 口)、白臘。
(2)方法
①用無菌鑷子取無菌小培育鋼環,環的兩面別離蘸取熔化的固體白臘,平置于無菌載玻片上,另取一無菌蓋玻片,在酒精燈火焰上加熱后覆蓋于鋼環上,待冷后,小培育鋼圈即被固定于載玻片與蓋玻片之間。
②用毛細滴管吸取消融的培育基,從鋼環上端孔注入,注入量占容積的1/2即可。
③培育基冷卻凝結后,用接種針挑取資料,由上端孔接種于環內培育基上。
④置濕盒內,室溫或37℃下培育2—3d后,逐日調查,鏡下可接連看到真菌成長過程及菌絲、孢子等特征,一般7d左右即可長好。
⑤也可不用小培育鋼環,直接將消融的培育基滴于無菌玻片上,待冷凝后從周邊接種資料,用蓋玻片覆蓋后培育,在顯微鏡下接連調查成長狀況。
(3)成果:鏡下調查可見到有胞壁增厚的厚膜孢子及假菌絲。

 

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