當前位置:上海酶聯生物研究所>>技術文章>>分析ELISA樣本值低于空白值的原因
在ELISA試驗中,當樣本值較低挨近試劑盒的靈敏度就容易發生樣本值低于空白值的現象,特別是在血清和血漿樣本的檢測。我公司ELISA試劑盒技能專家對此現象的原因剖析有兩個方面,一是試驗差錯、二是基質效應 。
、試驗差錯
差錯分為三類,系統差錯、隨機差錯和過錯差錯。這三類差錯中,系統差錯對樣本值和空白值之間的差異無影響。ELISA樣本值低于空白值在差錯方面首要來源于隨機差錯和過錯差錯。
、基質效應
剖析中,基質指的是樣本中被剖析物之外的組分,基質常常對剖析物的剖析進程有明顯的攪擾,并影響剖析成果的準確性,這些影響和攪擾被稱為基質效應。ELISA試劑盒在開發進程中,規范品不能選用人或動物血清、血漿作為規范曲線的稀釋液,只能選用其模仿物。模仿物與被測樣本在蛋白豐度、復雜性、pH等因素都會存在差異。當樣本的基質與其模仿物相比,下降抗原抗體的結合,便產生了樣本值低于空白值的現象。形成樣本值無法計算出數值,或許數值為負。
目前zui常用的去除基質效應的辦法是,經過已知剖析物濃度的規范樣品,一起盡可能堅持樣本中的基質不變,樹立一個校正曲線。
當單個樣本或少數樣本值低于空白值時,可能是差錯原因,這時應增加重復,提高操作技能。當大量樣本都低于空白值時,應考慮基質效應的影響,樹立校正曲線予以批改。
我們公司長時間代理國內外品牌產品,產品包含試劑盒、生化試劑、規范品、抗體、血清。以上內容如有不太清楚的地方,或是了解其它技能問題,歡迎您聯絡我司業務員咨詢。
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