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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

時(shí)間:2017-8-8閱讀:373
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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析:
(1)孵育完畢后取出微孔板,如果采用水浴法,用吸水紙吸干外壁的水分。
(2)在微孔后面放置一張白紙并觀察孔內(nèi)的顏色變化。
(3)從微孔壁側(cè)面所能觀察的顏色比從頂部或者底部所能觀察到的更準(zhǔn)確。
(4)有時(shí)候孵育時(shí)在微孔側(cè)旁會(huì)出現(xiàn)氣泡,可以在沒有氣泡的另一側(cè)進(jìn)行觀察。
(5)對(duì)于一些顏色介于陰性和陽性質(zhì)控的樣品,需要進(jìn)行更進(jìn)一步的分析和重測(cè)。
使用時(shí)樣本的準(zhǔn)備事宜:
1、低值樣本制備:
1)將待測(cè)樣本用混合人血清(含被分析物濃度水平較低),或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋。
2)產(chǎn)生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本,一般為5個(gè)濃度水平。
3)濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。
2、高值樣本制備:
1)至少選用三個(gè)高濃度樣本,稀釋倍數(shù)應(yīng)為方法性能標(biāo)明的zui大稀釋倍數(shù)、并適當(dāng)增加或減小稀釋比例。
2)選取含被測(cè)物的高值樣本,必要時(shí)可添加被分析物的純品,并計(jì)算出理論值。
3)使用混合血清或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液,或測(cè)定方法要求的稀釋液對(duì)高值待測(cè)樣本進(jìn)行稀釋,使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi),并記錄稀釋倍數(shù)。
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