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卡邁舒化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司
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閱讀:421發(fā)布時間:2016-3-1
大鼠強啡肽(Dyn)ELISA檢測試劑盒
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠強啡肽(Dyn)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠強啡肽(Dyn)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
操作注意事項
大鼠強啡肽(Dyn)ELISA檢測試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品(200 pg/mL) | 0.5mL | 0.5mL | 按說明書進行稀釋 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進行稀釋 |
* | 6mL | 3mL | 按說明書進行稀釋 |
檢測抗體-HRP | 6mL | 3mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 20mL | 20mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
注:標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為:200、100、50、25、12.5、0pg/mL.
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
大鼠強啡肽(Dyn)ELISA檢測試劑盒操作步驟
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
7. 檢測范圍:6.25 pg/mL -200pg/mL
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或大鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
商鋪:http://www.kindlingtouch.com/st147486/
主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,科研生化試劑,中藥材標(biāo)準(zhǔn)品,微生物培養(yǎng)基,動物血清,科研抗體,實驗耗材。咨詢熱線:021-64055267 15800463228
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