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IHC、ICC、IF等,建議選擇注明的抗體,因?yàn)橐话愣际墙?jīng)過(guò)文章證明。
(5)檢測(cè)標(biāo)本類(lèi)型。用于檢測(cè)石蠟切片還是冰凍切片,一般能做石蠟切片的抗體,可能都可以用來(lái)檢測(cè)冰凍切片,但能做冰凍切片的抗體,不一定能檢測(cè)石蠟切片中的抗原。
(6)生產(chǎn)廠家。國(guó)外抗體生產(chǎn)商原裝抗體質(zhì)量一般沒(méi)問(wèn)題,但有點(diǎn)貴;而國(guó)內(nèi)分裝廠家用的一抗工作液,價(jià)格便宜,但有時(shí)結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性稍差,尤其不同批次重復(fù)性較差。
(7)價(jià)格與質(zhì)量的矛盾。動(dòng)物ELISA試劑盒一抗原裝質(zhì)量可能會(huì)好點(diǎn),因?yàn)樵S多一抗避免反復(fù)凍融,且在稀釋液中穩(wěn)定性較差(若時(shí)間長(zhǎng)),但價(jià)格較貴。
2、二抗選擇要點(diǎn)
(1)種屬來(lái)源。主要根據(jù)一抗種屬來(lái)源來(lái)決定購(gòu)買(mǎi)二抗來(lái)源,如一抗是小鼠來(lái)源,那二抗就買(mǎi)抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
(2)標(biāo)記物的選擇。有HRP、Biotin、熒光素等標(biāo)記物。一般SP三步法二抗選擇Biotin標(biāo)記的二抗,以與后面的SP結(jié)合反應(yīng);而免疫熒光染色就需要購(gòu)買(mǎi)不同熒光素標(biāo)記的二抗,動(dòng)物ELISA試劑盒如羅丹明、FITC、Cy3等常用熒光素。這主要與后面有無(wú)三抗和三抗種類(lèi)有關(guān)。
(3)選擇IgM還是IgG。一般一抗是IgM,那么二抗就選擇IgM;反之,一抗是IgG,則二抗選擇IgG
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