雖然有了ELISA試劑盒后，是方便了很多。可是不管是植物ELISA試劑盒、小鼠elisa試劑盒還是植物ELISA試劑盒從生產到試驗都需要有個良好的環境。只有在zui合適的環境下才能得到zui的效果。以下就做了一個實驗：這些捐助者沒有被感染，提供捐助，將來的捐贈抗-HCV ELISA呈陰性。
其原因可能是兩個順序采用高陽性預測值，因為這兩種檢測方法的樣品反應有較高的概率是真實的。而不是那些只在一個反應里。ELISA試劑盒即使WHO準則中提到，如果驗證性測試不可用，可以使用一個備用的測定，這是作為主要的測定，用于確認樣品的狀態。
    可得出結論：ELISA試劑盒單一的ELISA試劑盒反應的樣品有很高的概率是由負NAT或RIBA顯示。樣本是由兩個不同的ELISA檢測抗-HCV體現，植物ELISA試劑盒其他概率是由NAT或RIBA多次反應數據的證實。因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現假陰性結果。因此在使用一步法測定標本中含量可異常增高的物質（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時，應注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單抗體制備此類可削弱鉤狀效應。假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型，雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性，這也是用單抗作夾心法應注意的問題。

    雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗體，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF，它可充當抗原成份，同時與固相抗體和酶標抗體結合，植物ELISA試劑盒表現出假陽性反應。采用F（ab'）或Fab片段作酶結合物的，由于去除了Fc段，從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA是否受RF的影響，已被列為這類的一項考核指標。雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。