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上海常斤生物科技有限公司
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閱讀:134發布時間:2015-11-27
下游應用為基因篩選、測序、突變檢測和分子診斷等等的用戶,對PCR保真性要求很高。
降低PCR擴增的錯誤率可以通過使用各種具有高保真性的dna聚合酶來實現。
DNA聚合酶的保真度用錯誤率來表示,包括堿基錯配率、PCR產物突變百分數等。
在目前已發現的所有耐高溫DNA 聚合酶中,Pfu酶的出錯率zui低,保真度zui高(見附表)。
除對酶進行選擇,研究者也可通過優化反應條件來進一步減少PCR突變率,包括優化緩沖液組成、耐熱聚合酶的濃度及對PCR循環條件進行優化等。
附表: DNA聚合酶的擴增錯誤率
耐熱DNA聚合酶
堿基錯配率
★PCR產物突變百分數(%)
Pfu DNA Polymerase
1.3×10-6
2.6
Taq DNA Polymerase
8.0×10-6
16.0
VentR ® DNA Polymerase
2.8×10-6
5.6
Deep VentR ® DNA Polymerase
2.7×10-6
5.4
Tfl DNA Polymerase
8.3×10-6
16.6
Tbr DNA Polymerase
9.5×10-6
19.0
ΜlTmaTM DNA Polymerase
55.3×10-6
110.6
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