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小鼠克拉拉細胞蛋白elisa試劑盒說明書

閱讀:155發布時間:2015-9-3

小鼠克拉拉細胞蛋白elisa試劑盒說明書

 本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
 1.5ng/L - 48ng/L

小鼠elisa試劑盒使用目的:
  本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中克拉拉細胞蛋白(cc16)含量。
小鼠elisa試劑盒實驗原理
  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠克拉拉細胞蛋白(cc16)水平。用純化的小鼠克拉拉細胞蛋白(cc16)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入克拉拉細胞蛋白(cc16),再與HRP標記的克拉拉細胞蛋白(cc16)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的克拉拉細胞蛋白(cc16)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠克拉拉細胞蛋白(cc16)濃度。 
小鼠elisa試劑盒標本要求 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

上海研晶生物技術有限公司是一家專業經營生物、儀器、試劑、耗材的公司,在廣大用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,代理許多*水平的高科技產品,包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷等多個研究及應用領域。


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