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信帆生物
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改良吉姆薩染色

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌GEMIG

廠商性質其他

所  在  地上海

更新時間:2024-11-11 11:17:06瀏覽次數:564次

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服務介紹:
組織切片及細胞涂片經吉姆薩染色后,各類細胞由于其成份的差異而呈現出不同的著色,從而達到分辨各類細胞的目的。本項目為改良吉姆薩染色,適用于血涂片,肺泡灌洗液細胞滴片,骨髓細胞涂片,石蠟切片和冰凍切片的染色,染色目的多為觀察各類炎性細胞的特征及數量分布。

服務介紹:

組織切片及細胞涂片經吉姆薩染色后,各類細胞由于其成份的差異而呈現出不同的著色,從而達到分辨各類細胞的目的。本項目為改良吉姆薩染色,適用于血涂片,肺泡灌洗液細胞滴片,骨髓細胞涂片,石蠟切片和冰凍切片的染色,染色目的多為觀察各類炎性細胞的特征及數量分布。

實驗流程:

涂片/組織切片-改良吉姆薩染色-脫水封片-顯微鏡鏡檢

結果判讀:

細胞類型

細胞特征及染色結果

成熟紅細胞

圓餅狀,粉紅色,無核

中性粒細胞

細胞核藍色,呈馬蹄形,桿狀或分葉形;胞質淡紫紅色

嗜酸性顆粒

細胞核藍色,呈馬蹄形,桿狀或分葉形;胞質內深紅色顆粒

嗜堿性粒細胞

細胞核藍色,呈馬蹄形,桿狀或分葉形;胞質內藍紫色顆粒

淋巴細胞

細胞較小,核藍色小而圓;細胞質較少呈藍紫色

單核細胞/巨噬細胞

細胞較大,細胞核藍色大而圓;細胞質淺藍紫色

 

樣本準備方法及送樣運輸要求(為保證染色成功率,血液、肺泡灌洗液、骨髓樣本建議客戶按以下方法自行涂片固定后送樣):

1.涂片的制作方法:

1.1 血涂片制備:

1)取新鮮血液(若用抗凝管收集的血液,放置最好不要超過24h,否則血液中白細胞的數量以及種類會明顯減少),選用干凈的粘附玻片,用移液槍吸取10ul的血液,滴加在玻片的一側(一般都是磨砂對側)

2)再取一片輔助玻片(也可選用蓋玻片,依據個人手的力道習慣選擇),以45°角將其寬邊靠近血液,血液沿著接觸邊緣向兩邊暈開,當兩邊都到達邊緣時,輕輕地穩健且勻速地推向磨砂面一側,進行涂片,然后快速果斷地拿走載玻片。可見涂片首尾分明,厚薄均勻。(一般情況下,涂抹速度力道適中的話,取走玻片時載玻片上的血幾乎無殘留,且涂抹出的血涂片無明顯細胞破碎,變形。在顯微鏡下可觀察到細胞呈單個緊密排列,整體比較均勻。)

3)自然晾干后,用甲醇浸泡固定15min,自然晾干后4℃保存運輸

1.2 肺泡灌洗液和骨髓涂片制備:

1)取細胞懸液,2800r 4℃離心5min去上清。若沉淀紅色較多,則需要用紅細胞裂解液(G2015)裂解紅細胞。細胞沉淀加入紅細胞裂解液200ul,渦旋混勻,放在冰上裂解2min后加入1ml PBS終止裂解。2800r 4℃離心5min去上清后加PBS重懸。若沉淀紅色不多,則不需要裂解紅細胞,直接棄上清液,加PBS重懸。根據細胞沉淀量對應加入PBS:

①若肉眼觀察無明顯細胞沉淀,直接加入50ul PBS,用移液槍吹打混勻后,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);

②若細胞沉淀量為綠豆大小,加入200ul PBS,用移液槍吹打混勻后,吸取50ul,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);

③若細胞沉淀量很多,黃豆大小或更大,加入1ml PBS,用移液槍吹打混勻后,吸取150ul,涂于粘附載玻片上提前用組化筆畫好的大圓圈中(最大長邊約5cm,最大短邊約2cm的橢圓)。在顯微鏡下觀察細胞量的多少,若還是過厚,再用PBS對倍稀釋該細胞懸液,直至在顯微鏡下觀察到細胞量涂布均勻。

2)用移液槍將細胞懸液鋪滿整個圓圈,涂片放置自然晾干(因細胞未經固定,不可通過烘箱加快晾干)。

3)將晾干后的涂片放入丙酮中浸泡固定1min,自然風干,4℃保存運輸。

2. 石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。

樣本種類

預處理過程

固定條件

保存運輸條件

備注

血液

5-10ul血液涂片

甲醇固定15min后自然晾干

4℃保存運輸

血液要用抗凝管采集,取血后立即涂片固定

肺泡灌洗液,骨髓

50-150ul細胞懸浮液涂片

 

 

丙酮固定1min后自然晾干

 

4℃保存運輸

 

樣品中紅細胞較多需要裂解紅細胞,取樣后立即涂片固定



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