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小鼠白介素-4(IL-4)elisa試劑盒簡介
IL-4的生物學活性包括以下幾個方面:①促使抗原或絲裂原活化的B細胞分裂增殖,但其作用遠弱于IL-2;然而IL-4能促使靜止的B細胞表達MHCⅡ類分子,增強B細胞的抗原遞呈能力,因此曾稱為B細胞刺激因子。IL-4是Ig重鏈基因類轉換的主要調節因子,能促使B細胞表達和分泌IgE。此外,IL-4還能誘導B細胞表達低親和力fc受體。②象IL-2一樣,IL-4也是CD4+T細胞的自分泌性生長因子;此外,IL-4還能促進tc細胞的活性。③IL-4不能刺激巨噬細胞增殖,但可增強巨噬細胞的功能;巨噬細胞受刺激后Ⅱ類抗原和fcγr的表達量均明顯增加;同時巨噬細胞遞呈抗原的能力及對腫瘤細胞的細胞毒素作用也顯著增強。④IL-4與IL-3協同可維持和促進肥大細胞的增殖,在某些起敏反應性疾病發生中具有一定的意義;可與CSF協同作用,促進骨髓造血前體細胞的增殖,誘導髓樣細胞定向分化;誘導內皮細胞表達血管細胞粘附分子-1(VCAM-1),對淋巴細胞的遷移具有一定意義。
小鼠白介素-4(IL-4)elisa試劑盒操作方法
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
1、操作簡單、快速。所有操作步驟,都有圖譜示意,讓你簡單明了,不必為研究操作步驟而耽擱時間。
2.靈敏度高。 酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應 ,產生可供觀察的顯色反應現象。我們的試劑盒實現了在ug、ng、pg水平上對其進行定量。
3.特異性強。特異性來自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原,保證的試劑盒品質。
4.性價比高,質量穩定。
5.樣品所需量少。
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