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人Ⅲ型膠原(PⅢP)elisa試劑盒是啥?

時間:2017-8-4閱讀:955
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人Ⅲ型膠原(PP)elisa試劑盒基本信息

Ⅲ型膠原蛋白,PP,Ⅲ型前膠原經氨基端內切肽酶。

中文名     Ⅲ型膠原蛋白

正常值     0.6μg/ml        

             PP

作用酶     Ⅲ型前膠原經氨基端內切肽酶

1979年國外已建立測定血清PP的放射免疫法(RIA),并證實肝纖維化時血清PP含量與肝炎癥,壞死和肝纖維化有關,但以肝纖維化相關為主,因此血清PP仍然是肝纖維化的重要標記物。PP對于診斷兒童肝疾病沒有意義,它隨兒童年齡的增長有所升高。許多學者報道,血清PP是反應成人肝纖維化活動的良好指標,可彌補肝活檢不能動態觀察等不足。肝硬化患者明顯升高,但在肝硬化晚期,因Ⅲ型前膠原肽合成率降低,血清中PP反而低于早期。PP在區別慢性活動性肝炎與慢性遷延性肝炎有良好的幫助,慢性肝PP水平明顯升高,而在慢遷肝其含量與正常人無明顯差別。

人Ⅲ型膠原(PP)elisa試劑盒如何操作

    1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為110μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml4 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。

  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

  3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml37 孵育0.51小時,洗滌。

  4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分鐘。

  5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

  6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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