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信帆生物
中級會員 | 第11年

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忍不住要分享大鼠肝細胞生長因子elisa試劑盒有關知識

時間:2017-6-14閱讀:984
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本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷大鼠(Rat)肝細胞生長因子(HGF)ELISA檢測檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被肝細胞生長因子(HGF)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細胞生長因子(HGF)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1. 酶標儀(450nm)2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃

恒溫箱操作注意事項

1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。

2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3.  濃度為0 的S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白;預處理后OD 值。結果判斷繪制標準曲線:在Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD 值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R 值,大于等于0.9900。

2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pg/mL。

3.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6 個月

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