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基質金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜電泳檢測試劑盒的使用注意事項

時間:2018/7/12閱讀:2380
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基質金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜電泳檢測試劑盒的使用注意事項

MMP檢測注意事項:細胞培養(yǎng)基要用無血清培養(yǎng)基;樣本裂解時不含EDTA,明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液 配制應嚴格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。因為檢測蛋白活性,所以應盡量避免蛋白變性,一般都要求冰上操作,電泳也放在冰水里進行的。

注意事項說明:

1.制備聚丙烯酰胺時應注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液配制應嚴格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子。

4.孵育液的PH在7.5-7.6,復性的TRITON時間長了會有絮狀物,所以實驗時盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中,因為會改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

6.明膠要4度保存,配好后1周內使用。

7.樣本活性低可以延長孵育時間到48小時

基質金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜電泳檢測試劑盒的使用注意事項

 

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